跳骨片水提物对体外大鼠关节软骨细胞活性的影响(2)
1 实验材料
1.1 实验动物 4周龄雄性SPF级SD大鼠5只，体质量60～80 g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物合格证号：SCXK(沪)2012-0002。根据《关于善待实验动物的指导性意见》(中华人民共和国科学技术部颁发)处理实验动物。
1.2 实验药物、试剂与仪器 跳骨片(福州屏山制药有限公司)；胎牛血清(Gbico公司)；MTT、Ⅱ型胶原酶(Sigma公司)；DMEM低糖培养基(HyClone公司)；二甲基亚砜(国药集团化学试剂有限公司)；DAB显色试剂盒、免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)；二氧化碳培养箱[力新仪器(上海)有限公司]；超净工作台(苏州净化设备有限公司)；酶标仪(美国Bio-tek有限公司)。
2 方 法
2.1 跳骨片水提物的制备 跳骨片去糖衣，称取粉碎后的粉末10.2 g，加入10倍量的蒸馏水浸泡
30 min，100 ℃回流提取3次，每次1 h，合并滤液并过滤，滤液浓缩至1 g·mL-1，真空低温烘成浸膏备用。
2.2 软骨细胞的分离和培养 4周龄SPF级SD大鼠 ......
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1.1 实验动物 4周龄雄性SPF级SD大鼠5只，体质量60～80 g，由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供，动物合格证号：SCXK(沪)2012-0002。根据《关于善待实验动物的指导性意见》(中华人民共和国科学技术部颁发)处理实验动物。
1.2 实验药物、试剂与仪器 跳骨片(福州屏山制药有限公司)；胎牛血清(Gbico公司)；MTT、Ⅱ型胶原酶(Sigma公司)；DMEM低糖培养基(HyClone公司)；二甲基亚砜(国药集团化学试剂有限公司)；DAB显色试剂盒、免疫组化试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)；二氧化碳培养箱[力新仪器(上海)有限公司]；超净工作台(苏州净化设备有限公司)；酶标仪(美国Bio-tek有限公司)。
2 方 法
2.1 跳骨片水提物的制备 跳骨片去糖衣，称取粉碎后的粉末10.2 g，加入10倍量的蒸馏水浸泡
30 min，100 ℃回流提取3次，每次1 h，合并滤液并过滤，滤液浓缩至1 g·mL-1，真空低温烘成浸膏备用。
2.2 软骨细胞的分离和培养 4周龄SPF级SD大鼠 ......
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