潘丹虹 李路 王文义 林晴 付长龙 吴广文 叶锦霞

    【摘 要】目的：观察荣筋拈痛方对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的体外大鼠软骨细胞自噬相关基因表达的影响，探讨其防治膝骨关节炎的作用机制。方法：取4周龄SD大鼠膝关节软骨，进行软骨细胞的体外分离培养，选取第2代软骨细胞甲苯胺蓝染色进行细胞鉴定。经IL-1β 10 ng·mL-1诱导建立体外软骨细胞炎症模型，诱导成功后，给予荣筋拈痛方(50，100，200 μg·mL-1)孵育48 h。将细胞分为空白对照组，模型对照组，荣筋拈痛方低、中、高剂量组。分别采用CCK-8法检测荣筋拈痛方对软骨细胞活性的影响，qPCR法检测软骨细胞中LC3Ⅱ、Beclin 1的mRNA表达，Western Blot法观察自噬蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Beclin 1的蛋白表达水平。结果：与模型对照组比较，荣筋拈痛方低、中、高剂量组均显著提高细胞活力，呈剂量依赖性增加(P < 0.01);模型对照组较空白对照组LC3Ⅱ、Beclin 1的mRNA及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的蛋白表达水平升高(P < 0.05);经100 μg·mL-1荣筋拈痛方干预后LC3Ⅱ、Beclin 1的mRNA及LC3Ⅱ/Ⅰ、Beclin 1的蛋白表达水平降低(P < 0.05)。结论：荣筋拈痛方可能通过抑制自噬水平，从而具有延缓膝骨关节炎退变的作用。

    【关键词】 膝骨关节炎;荣筋拈痛方;软骨细胞;自噬;白细胞介素-1β;大鼠

    【ABSTRACT】Objective：To observe the effect of Rongjin Niantong Fang(荣筋拈痛方)on theexpression of autophagy related gene of interleukin-1β-induced rat chondrocytes in vitro and its mechanism in the prevention and treatment of knee osteoarthritis.Methods：The knee cartilages of 4-week-old SD rats were isolated and cultured in vitro.The second-generation chondrocytes were stained with toluidine blue for cell identification.Via IL-1β 10 ng·mL-1 ......