付长龙 涂海水 张文键 陈毅涛 陆诗雨 李超 金灵璐 郑春松

    【摘 要】目的：探讨狗脊多糖通过调节lncRNA NEAT1延缓椎间盘终板软骨细胞衰老的作用机制。方法：将15只C57BL/6小鼠的椎间盘终板软骨细胞进行体外培养；经10 ng·mL-1白细胞介素-1β(IL-1β)干预24 h诱导软骨细胞；将软骨细胞随机分为空白对照组、模型对照组(10 ng·mL-1 IL-1β)和狗脊多糖各剂量组(100，200，400 μg·mL-1)；Real-time PCR及Western blot分别检测狗脊多糖对IL-1β诱导软骨细胞lncRNA NEAT1、衰老相关通路p53-p21中p53、p21水平及衰老相关分泌表型的基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、CollagenⅡ、Caspase-3蛋白表达情况；流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率情况。结果：Real-time PCR结果显示，经IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞中lncRNA NEAT1、p21、p53水平显著增高；与模型对照组比较，狗脊多糖各剂量组lncRNA NEAT1、p21、p53水平显著降低；与空白对照组比较，经IL-1β诱导的椎间盘终板软骨细胞中MMP-13、Caspase-3蛋白表达含量显著增高，CollagenⅡ蛋白表达降低；经狗脊多糖干预后，可显著改善MMP-13、CollagenⅡ、Caspase-3蛋白表达；此外，与模型对照组比较，狗脊多糖各剂量组椎间盘终板软骨细胞凋亡率呈现下降趋势。结论：狗脊多糖通过调控lncRNA NEAT1影响p53、p21、MMP-13、CollagenⅡ、Caspase-3表达，降低软骨细胞凋亡率，进而延缓椎间盘终板软骨细胞衰老。

    【关键词】 椎间盘退变；狗脊多糖；軟骨细胞；长链非编码RNA NEAT1；衰老；小鼠 ......