锰中毒对SH-SY5Y细胞线粒体自噬作用的影响
帕金森,帕金森病,多巴胺,1材料与方法,2结果,3讨论
李慧颖,陆潭丽,王 进(广西医科大学,广西 南宁 530021)
帕金森病(PD)是第二大神经退行性疾病,多发于65岁以上人群[1]。大多数PD患者为散发的特发性PD,其发生考虑与环境、遗传因素之间的相互作用有关。PD的神经病理特征包括中脑黑质致密部多巴胺能神经元的丢失和含有α-突触核蛋白的路易小体的蓄积[2]。广西具有丰富的锰矿资源,然而过量的锰暴露是一种公认的环境健康危险因素,可诱导类似帕金森病的锥体外系功能异常[3]。环境锰污染及其引起的中毒性帕金森综合征是一个重要的公共卫生问题,但其发病机制尚未完全清楚。线粒体通过不断分裂和融合,可控制细胞的大小、形态和数量,以维持细胞的正常活动[4]。线粒体的稳态被破坏和线粒体功能紊乱在神经退行性疾病的病理生理过程中起着重要作用,进一步凸显了这些细胞器的重要性,特别是在神经元中的重要性[5]。而在神经组织中,锰对线粒体具有特殊亲和力,会特异性蓄积在富含线粒体的神经细胞和神经突触中,最终导致神经元功能障碍和病理损伤。本研究旨在探讨锰中毒对SH-SY5Y细胞多巴胺分泌以及线粒体动力学的影响,为锰中毒性帕金森综合征的病理机制提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 主要试剂及仪器 氯化锰 (MnCl2)购于美国Sigma公司(批号:WXBC7094V);胎牛血清(FBS)购于美国Gibco公司(批号:1982158C);DMEM基础细胞培养基购于美国Corning公司(批号:08018008);胰酶(批号:20180506)、1%青-链霉素(批号:20180602)、磷酸盐缓冲液(PBS,批号:20180807)均购于北京索莱宝科技有限公司;人多巴胺酶联免疫试剂盒购于CUSABIO技术有限公司(批号:C123060148);β-actin(14)、LC3(11)、Mfn1(1)、Mfn2(3)、Drp1(3)抗体及荧光二抗(9)均购于美国CST公司;BCA蛋白质测定试剂盒购于上海碧云天生物技术有限公司(批号:P0012S);CCK-8试剂盒购于日本同仁化学研究所(批号:LQ732) ......
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