扶芳藤提取液对小鼠肝癌微环境中BMSCs Yap蛋白表达的影响
共培养,1实验材料,2方法,3结果,4讨论
张 齐,高 月,刘 显,李熠毅(广西中医药大学,广西 南宁 530200)
骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal?stem cells,BMSCs)是一种具有易于体外分离、扩增,多向分化等潜能的非造血干细胞[1-2]。近年,BMSCs已然成为现代众学者热门研究的课题之一,但BMSCs亦可在肿瘤微环境中出现形态及染色体等异常改变,进而发生恶性转化[3]。因此,如何安全、有效地将BMSCs应用于临床治疗与研究(特别是肿瘤)已成为当务之急。扶芳藤Euonymus fortunei(Turcz.)Hand.-Mazz为卫矛科卫矛属植物,具有抗氧化、提高免疫力及改善血流变等功效[4-5],笔者欲通过体外模拟小鼠肝癌微环境,并加以扶芳藤提取液进行干预,检测小鼠肝癌微环境中BMSCs Yap蛋白的表达情况,以期观察扶芳藤提取液对小鼠肝癌微环境中BMSCs是否具有保护作用,并探讨肿瘤微环境中BMSCs发生恶性转化的可能机制。
1 实验材料
1.1 细胞 小鼠BMSCs细胞株(广州赛业生物科技有限公司,Catalog Number:MUBMX-01001);小鼠Hepa1-6肝癌细胞株(中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心,Catalog Number:TCM39)。
1.2 试药 参考文献[6]方法制备扶芳藤提取液:取1 kg扶芳藤,加入10倍量水,置于不锈钢锅内蒸煮1 h后过滤,留取过滤液;药渣加入8倍量水,煮开后文火煎30 min,过滤除渣,合并2次过滤液,浓缩至1 000 ml时,冷却;加入95%食用乙醇 ......
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