银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠TGF-β1、MMP-9及NF-κB表达的影响
造模,肺泡,1实验材料,2方法,3结果,4讨论
卢岳虹,潘 玲,黄茹妍,罗湘蓉,谭玉萍,黎展华(广西中医药大学附属瑞康医院,广西 南宁 530011)
肺纤维化(pulmonary fibrosis,PF)是一种慢性、进行性、纤维化性间质性肺疾病,其病理特点主要是肺成纤维细胞(fibroblast,FB)不断增生和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)过度沉积,最后造成肺组织结构的破坏,最终导致慢性呼吸衰竭[1-2]。近年来肺纤维化的发病率不断升高,目前,临床常用吡非尼酮、尼达尼布两种药物治疗肺纤维化,可以减缓疾病的进展,但并不能完全有效地降低死亡率[3],且治疗费用较高,肺纤维化患者的预后仍然很差。银杏叶为银杏科植物银杏的叶,其性味苦、涩、平,具有化痰平喘敛肺、活血祛瘀、通络止痛、补气养心等功效,早在唐代的《食疗本草》中就有银杏叶可用于治疗心悸怔忡、肺虚咳喘等病症的记载[4]。银杏叶提取物主要含有黄酮类、萜类内酯、氨基酸、微量元素等多种化学成分[5]。熊红等[6]研究发现,银杏叶提取物在早期肺泡炎阶段可抑制肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)表达,且在肺纤维化进展中其抑制效果明显优于强的松。本实验观察银杏叶提取物对PF模型大鼠肺组织转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及核转录因子-κB(NFκB)表达的影响,为银杏叶提取物治疗PF挖掘病理生理学的潜力依据,寻找可靠的多环节调控的中医药治疗方法,从而抑制疾病进展。
1 实验材料
1.1 动物 SPF级雄性SD大鼠72只,体质量180~200 g,动物由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,许可证号为SCXK(湘)2016-0002。大鼠饲养于广西中医药大学实验动物中心(温度22~25℃,湿度60%~70%),可自由饮水及进食,饲养观察1周。
1.2 药物与试剂 博来霉素(索莱宝生物科技有限公司);吡非尼酮(北京康蒂尼药业有限公司,规格:每粒100 mg);银杏叶提取物(德国威玛舒培博士药厂,规格:每片40 mg);大鼠TGF-β1酶联免疫试剂盒(武汉云克隆科技股份有限公司);MMP-9以及NF-κB免疫组化试剂盒(北京博奥森生物技术有限公司)。
1.3 仪器 BX51T-PHD-J11型显微镜(日本奥林巴斯);RM2015型石蜡切片机(德国莱卡);5430/5430R型离心机(德国Eppendorf公司);MDF-382E型低温冰箱(日本三洋);DSHZ-300型恒温水浴箱(江苏太仓医用仪器厂)。
2 方法 ......
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