扶正肺瘤方对黑色素瘤B16体内抑制作用的研究
转移率,1材料,2方法,3结果,4讨论
欧阳郴生,赵 霞,古宏晖,杨丽娜,陈 钟,汪桃利(深圳市中医院 肿瘤科,广东 深圳 518033)
扶正肺瘤方是我科临床长期运用的治疗肺癌的中药复方,具有一定的临床疗效,为进一步研究其确切作用,我们通过建立BALB/C无胸腺裸小鼠黑色素瘤B16模型,观察扶正肺瘤方对肿瘤生长和转移的作用,研究如下。
1 材料
1.1 动物 BALB/C无胸腺裸小鼠,体质量18~20 g,4~5周龄,清洁级,36只,雌雄各半,中国医学科学院动物研究所提供,饲养环境为无特殊病原体条件(SPF)。
1.2 瘤株 黑色素瘤B16,购自中山医科大学肿瘤研究所。
1.3 供试品 扶正肺瘤方,由本院制剂室提供,用生理盐水配制成不同浓度药液,2~8 ℃冷藏备用。
1.4 试剂 福尔马林液、双抗(链霉素100 μg/mL,青霉素100 U/mL),胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶,D-Hanks液、谷氨酰胺,RPMI1640培养基。
1.5 实验器材 游标卡尺,哈尔滨北量螺纹量规工具制造厂;电子天平,BS22型,德国赛多利斯;倒置显微镜,CKX31型,Olympus公司;CO2培养箱,2406-2型,美国Sheldon公司。
2 方法
2.1 黑色素瘤B16细胞培养 参照文献[1]方法,B16黑色素瘤瘤株在10%胎牛血清RPMI1640培养基(含双抗),37 ℃,5%CO2环境中进行传代培养。取对数生长期的肿瘤细胞,吸去培养液,收集细胞,D-Hank液洗涤2次,台盼蓝染色,显微镜下计数存活肿瘤细胞,存活肿瘤细胞应大于95% ......
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