张 丽，周长征

    (山东中医药大学药学院，山东 济南 250355)

    木芙蓉叶为锦葵科植物木芙蓉HibiscusmutabilisL.的干燥叶，其味微辛，性凉，归肺、肝经，具有清肺凉血、散热解毒、消肿排脓等功效，临床主要用于肺热咳嗽、瘰疬等的治疗[1]。本实验通过体外建立细胞感染模型试验和体内感染小鼠试验来验证木芙蓉叶提取物具有抗病毒的药理活性，以期为木芙蓉叶能开发成一种防治病毒的新药提供药效学依据。

    1 实验材料

    1.1 药物 木芙蓉HibiscusmutabilisL.叶购于安徽濠州药材市场，由周凤琴教授鉴定。阳性对照药利巴韦林针剂(100mg/mL，山东鲁抗医药集团有限公司)。

    1.2 病毒 呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(Flu A)和副流感病毒(HPIVs)均引自中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所。

    1.3 细胞 HEK-293细胞(人胚胎肾细胞系)购自美国Clontech公司。

    1.4 试剂 MEN培养基(美国Gibco公司)；新生小牛血清(杭州四季青公司)；胰酶(美国Gibco公司)；细胞维持液(含2%新生牛血清的MEN)；细胞培养液(含10%新生小牛血清的MEN)；其他试剂均为分析纯。

    1.5 仪器 CO2恒温培养箱(美国Forma公司)；-80 ℃冰箱(美国Forma公司)；-20 ℃冰箱(中国青岛得贝公司产品)；酶标仪(芬兰Labsystems公司)；倒置显微镜(日本Olympus公司)；高速离心机(德国Heraeus公司)；旋转蒸发仪(中国上海鑫培仪器设备有限公司)。

    1.6 动物 昆明种鼠，雄性，体质量13～14 g，洁净级，引自山东大学动物中心。

    2 实验方法

    2.1 提取物的制备 木芙蓉叶煎煮3 h ......