刘丽丽，李 爽，李海东，宋卓敏

    (1.天津中医药大学，天津 300193；2.天津医科大学生物化学与分子生物学系，天津 300070；3.天津中医药大学中医药研究院，天津 300193)

    1 材料与方法

    1.2 含药血清制备 选SD大鼠，体质量(375±25)g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。实验前，置动物于室内适应环境，常规喂养1周。将体质量≥400g或者≤350g的SD大鼠予以剔除。共体质量相近的SD大鼠50只，按随机数字表法分为4组：正常对照组、中药高、中、低剂量组，每组10只。正常对照组：给予蒸馏水。中药高、中、低剂量组：用药剂量为根据人的日用药量，按大鼠体表面积比率换算成等效剂量的2、1、0.5倍，具体数据分别为4、2、1g/kg干粉(相当于18、9、4.5g/kg生药)。每次1mL/100g体质量，每天2次，间隔10h，连续灌胃5d，第5天上午灌服药物后1h腹主动脉取血，离心处理后，取血清2mL左右，置于无菌试管中，56℃水浴灭活30min，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，密封，-20℃冰箱中冻存。

    1.3 实验试剂和仪器 17β-雌二醇(美国Sigma公司)；ICI-182780(美国Sigma公司)。人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)购自中国科学院上海细胞库，体外培养传代；DMEM培养基(美国GIBCO)；优质小牛血清(杭州四季青生物工程材料有限公司)；MTT粉(北京天港邦定生物医学科技有限公司)；二甲基亚砜(上海菲达有限公司)；青、链霉素(华北制药股份有限公司)；流式细胞仪(FCM，Becton-dickinson公司)。

    1.4 研究方法

    1.4.1 细胞培养 人脐静脉内皮细胞株(EA.hy926)，接种于含10%小牛血清、100U/mL青霉素、100mg/L链霉素的DMEM培养基中 ......