陈芳园，闵仲生

    (1.南京中医药大学，南京210029;2.江苏省中医院，南京210029)

    痤疮是一种临床常见好发于毛囊皮脂腺的慢性炎症性疾病，各年龄皆可发病，青少年时期发病率最高。近年来由于饮食结构及环境等改变，发病率有上升趋势，由于病程较长，严重者可发展成结节、囊肿以及聚合性痤疮，愈后容易留下痘印凹坑，严重影响美观，造成患者的心理压力。三黄泻心汤出自张仲景《金匮要略》[1]“大黄2两，黄连1两，黄芩1两，以水3升，煮取1升，顿服之”。方中大黄为主药，黄连、黄芩为辅药。本实验采用不同浓度三黄泻心汤水提物，观察在体外对痤疮丙酸杆菌生长的抑制情况。报告如下。

    1 材料

    1.1 菌株 痤疮丙酸杆菌冻干菌株标准菌株(ATCC11827，购自广东省微生物研究所)。

    1.2 试药 注射用乳糖酸红霉素粉针(购自湖南科伦制药有限公司，批号:1310202B);三黄泻心汤(由江苏省中医院药剂科配置提供)。厌氧指示剂、厌氧产气袋(选自日本三菱瓦斯株式会社);琼脂(L3027，购自美国Sigma-Aldrich公司)。

    1.3 仪器 恒温生化培养箱(选自上海跃进医疗器械有限公司);数显气浴恒温振荡器(常州赛普实验仪器厂);立式压力蒸汽灭菌器(选自博讯实业有限公司医疗设备厂);WGZ-1A浊度计(上海昕瑞仪表有限公司);BSA224S电子天平(赛多利斯科学仪器[北京]有限公司);7.0 L厌氧盒(三菱瓦斯化学株式会社)。

    2 方法与结果

    2.1 痤疮丙酸杆菌的复苏以及菌悬液的制备 琼脂培养基115℃高压灭菌15 min浇板，作为冻干菌株复苏平板。微生物限度室内，将全部菌体悬液，移植于琼脂培养基，平推后置于厌氧培养盒内，37℃厌氧培养48 h，挑取单个生长菌落至肉汤培养基。

    2.2 菌落计数 提取已经配备好的菌悬液1 mL，加到9 mL装有生理盐水的试管中，就可以得到稀释10倍的菌液。从稀释10倍的菌悬液中移取1 mL至9 mL生理盐水中，从而得到稀释100倍的菌液。以此类推，依次稀释，直至得到稀释1 010倍的菌液，从中各移取0.5，1 mL到平板培养基上，均匀涂布，37℃厌氧培养48 h，然后对生长的菌落进行计数，作出细菌的生长标准曲线。调整细菌浓度至106，待用。

    2.3 中药药液稀释 采用试管稀释法 ......