黄启婷，董 筠

    (南京中医药大学附属医院，南京210029)

    胃食管反流病(GERD)是指因食管胃连接处防反流机制障碍而导致胃或肠内容物反流入食管，从而引起食管炎症的疾病[1]。近几年研究[2-3]发现，胆盐被认为是胃食管反流病中造成食管损害的主要物质之一，脱氧胆酸(Deoxycholic acid，DCA)作为胆汁的重要成分，长时间的作用可引起凋亡改变。p38MAPK是细胞内重要的信号转导分子，调控多种基因的表达，参与细胞的增殖、分化、凋亡以及介导炎症、应激等多种生理、病理过程[4]。本课题组前期研究[5-6]发现，降逆护膜汤对胃食管反流病有良好的防治作用。本研究旨在探讨降逆护膜汤治疗胃食管反流病的机制。

    1 实验材料

    1.1 实验药物 降逆护膜汤(黄连3 g，吴茱萸2 g，党参10 g，旋覆花5 g，赭石20 g，黄芩6 g，乌贼骨20 g，大贝母 10 g，仙鹤草 15 g，白及6 g，炒枳壳 10 g，厚朴10 g)共117 g，用1170 mL蒸馏水加热回流提取2次，每次60 min，合并提取的药液，用三蒸水稀释成浓度为100 mg/mL，灭菌备用。

    1.2 试剂与设备 RPMI-1640培养液(凯基生物);胎牛血清(杭州四季青);胰蛋白酶(Gibco公司);SB203580(selleck公司);脱氧胆酸(DCA)(sigma公司);鼠抗人β-actin单抗(sigma公司);兔抗人P38单抗(Cell Signalin g公司);兔抗人p-P38单抗(Cell Signaling公司);兔抗人 Bax单抗(Cell Signaling公司);鼠抗人Bcl-2单抗(santa cruz公司);山羊抗鼠多克隆抗体(北京中杉生物技术公司) ......