半夏提取物对小鼠肺水通道蛋白5表达的影响
光镜,比值,1实验材料,2实验方法,3结果,4讨论
周建龙,邓青南,梁 静(广州军区广州总医院,广州510010)半夏提取物对小鼠肺水通道蛋白5表达的影响
周建龙,邓青南,梁 静
(广州军区广州总医院,广州510010)
目的 了解急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白5(AQP5)的表达变化,探讨半夏提取物(EP)治疗ALI的药理机制,为半夏的临床应用提供理论基础。方法 36只昆明种小鼠随机分成3组,即空白对照组(NS组)、肺损伤造模组(ALI组)和半夏提取物治疗组(EP组),6 h后观察测定肺组织湿干重比值(W/D),HE染色光镜下观察肺炎症变化,ELISA法检测小鼠血清TNF-α浓度,RT-PCR检测肺组织匀浆AQP5 mRNA表达情况。结果 ALI组小鼠肺部炎症反应显著,中性粒细胞浸润为主,同时肺泡明显充血水肿。EP组肺组织炎症减轻、充血消退。与NS组和EP组比较,ALI组的W/D值差异有统计学意义(P<0.05);ALI组肺组织AQP5 mRNA的表达,较NS组显著降低,较EP组的表达显著升高(P<0.05)。ALI组血清TNF-α的表达,较NS组显著升高,较EP组的表达显著降低(P<0.05)。结论 半夏提取物可通过上调肺AQP5的表达减轻肺水肿,作用机制可能是通过抑制炎症因子TNF-α的表达实现的。
肺损伤;半夏提取物;水通道蛋白5;小鼠
急性肺损伤是呼吸系统常见重症,致残率和病死率高,目前研究[1]发现水通道蛋白(AQP),尤其是AQP5在维持肺泡内外稳态平衡起到关键作用。中医中药对急性肺损伤有明显的治疗效果[2-3],半夏提取物或复方半夏汤剂均发现可调节AQP在肺组织内的表达[4],但半夏能否通过调节AQP来减轻或治疗急性肺损伤目前尚无研究。本实验通过观察半夏提取物对急性肺损伤的干预,为中药治疗肺损伤提供理论基础。
1 实验材料
1.1 动物、试剂与仪器 36只8周龄雄性健康昆明种小鼠(广东省动物实验中心,合格证号:4407209314),体质量18~20 g。RNA提取及逆转录试剂盒(美国Promega公司);脂多糖内毒素LPS(美国Sigma公司);AQP5(上海生工公司);肿瘤坏死因子αEL ISA试剂盒(武汉博士德公司);半夏(广州军区广州总医院)。
1.2 半夏提取物制备 用水煎醇提法取0.5 kg法半夏 ......
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