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编号:978355
苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响
http://www.100md.com 2016年5月6日 长春中医药大学学报 2016年第2期
     陈 伟,田 鲁,王 港,李 易,2*

    (1.黄石市中心医院肾内科,湖北 黄石 435000;2.湖北理工学院医学院,湖北 黄石 435000)

    苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠肾脏细胞间纤连蛋白和胶原Ⅳ蛋白表达的影响

    陈伟1,田鲁1,王 港1,李易1,2*

    (1.黄石市中心医院肾内科,湖北 黄石 435000;2.湖北理工学院医学院,湖北 黄石 435000)

    摘要:目的探讨苦瓜总皂苷对2型糖尿病肾病大鼠细胞间纤连蛋白(FN)和胶原Ⅳ蛋白(Ⅳ-CP)表达的影响。方法雄性SD大鼠48只随机分为正常对照组、2型糖尿病肾病模型组及苦瓜总皂苷5 mg/(kg·d),治疗组左肾切除加1次大剂量链脲佐菌素腹腔注射建立动物模型,正常对照组和模型组给予生理盐水灌胃,苦瓜总皂苷治疗组给予苦瓜总皂苷灌胃,分别于实验第4、8周处死大鼠各半,测血糖、24 h尿蛋白定量以及炎性因子;免疫组化、RT-PCR以及Western Blot检测FN和Ⅳ-CP蛋白的表达。结果治疗组尿蛋白和血清肌酐与模型组相比明显减少,血糖明显升高(P

    表1 纤连蛋白和Ⅳ型胶原引物

    1.6Western Blot检测大鼠肾组织中纤连蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达称取100 mg肾脏组织,电子匀浆机磨碎,低温高速匀浆机离心,4 000 r/min,离心后取上清液分装于1 mL的离心管中并置于超低温冰箱中保存,电泳时每组各取样本60 μg进行蛋白电泳,电泳方法按照文献[4]进行,收集到电泳图片后用Image J计算各条带的灰度值,Image J计算灰度值。

    2结果

    2.1实验大鼠一般情况从造模成功后开始记录大鼠一般情况,正常组大鼠饮食、饮水、精神状态以及平常活动均正常,同时毛发光滑;模型组大鼠均呈现出明显的多尿、多饮、多食等症状,其精神明显不佳,此外毛发可见其明显杂乱,同时表现有淡黄色(可能沾有尿液),治疗组大鼠在治疗4周后相较于正常组饮食也呈增加的趋势,但没有模型组增加量大,治疗8周后与治疗4周后基本一致。

    2.2大鼠血糖、24 h尿蛋白定量及血肌酐和血浆白蛋白变化见表2、表3 ......

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