陈丽艳，王天龙，王 萍，王伟明

    (黑龙江省中医药科学院中药所，哈尔滨 150036)

    ·方药研究·

    黄瓜籽蛋白提取工艺及性质研究

    陈丽艳，王天龙，王萍，王伟明*

    (黑龙江省中医药科学院中药所，哈尔滨 150036)

    摘要：目的确定黄瓜籽蛋白最佳提取工艺，并对蛋白等电点及分子量进行考察。方法采用盐溶法通过L9(34)正交试验进行提取工艺考察，通过测定最低溶解度的pH值确定蛋白等电点、硫酸铵分级沉淀及膜透析除盐得到黄瓜籽蛋白，并利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白分子量。结果黄瓜籽蛋白最佳提取工艺为NaCl溶液浓度0.14 mol/L、料液比1∶3、提取温度4 ℃、pH值5、浸提时间8 h、提取次数为3 次，经计算生药黄瓜籽中蛋白含量为3.04%，硫酸铵沉淀饱和度为55%，等电点为3.8，蛋白分子量分布于35 KD以下。结论本法确定了黄瓜籽蛋白的最佳提取工艺及性质，为蛋白的进一步分离、纯化及活性研究奠定了基础。

    关键词：黄瓜籽；蛋白质；提取工艺；等电点；分子量

    黄瓜籽为葫芦科植物黄瓜(CucumbersativusL.)的干燥成熟种子。《中华本草》中记载其具有续筋接骨、祛风、消痰的功效，主治骨折筋伤、风湿痹痛、老年痰喘[1]。黄瓜籽中含有皂苷、氨基酸、糖类、植物甾醇、三萜类、挥发油等化学成分[2]，而对其蛋白质的研究尚不足。植物种子一般含有丰富的蛋白质，且具有广泛的生物活性，如大豆蛋白、南瓜籽蛋白等对人体多种疾病有预防和治疗作用[3-4]。从植物中提取蛋白质的方法有多种，其中盐溶法有利于保持蛋白的活性和稳定性[5-6]。本研究利用盐溶法提取黄瓜籽蛋白，通过正交试验确定最佳提取工艺，并测定蛋白等电点、分析硫酸铵分级沉淀饱和度，并通过SDS-PAGE凝胶电泳检测蛋白分子量分布，为黄瓜籽蛋白进一步分离、纯化及活性研究奠定基础。

    1材料

    1.1仪器UV-2550 型紫外可见分光光度计(上海第三分析仪器厂)；KE.WEI 型电热恒温水浴锅(北京科伟永新实验仪器设备厂)；AF-20A型密封型摇摆式中药粉碎机(温岭市奥利中药机械有限公司)；98-1-C型数字控温电热套(天津市泰斯特仪器有限公司)；SHB-IIIA型循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；YP2001N型、YP20KN型电子天平(上海精密科学仪器有限公司)；透析袋 3.5 KD截留量 27 mm(美国)；X85-2恒温磁力搅拌器(上海梅颖浦)；DYY-12型电泳仪(北京市六一仪器厂)；BCD-225SLDA智能控温电冰箱(海尔) ......