HPLC法测定酵母菌细胞内维生素B1含量
测定方法,提取液,1实验材料,2实验方法,3结果,4小结
尹 鹏,于 倩*,李 忻,孙 岩,陈 雪,王恩鹏(1.吉林大学中日联谊医院,长春 130033;2.长春中医药大学,长春 130117)
HPLC法测定酵母菌细胞内维生素B1含量
尹鹏1,于倩1*,李忻1,孙岩2,陈雪2,王恩鹏2
(1.吉林大学中日联谊医院,长春 130033;2.长春中医药大学,长春 130117)
目的建立酵母菌细胞内维生素B1的含量测定方法。方法采用Thermo DBS-C18分析柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为水-甲醇(70∶30),流速1.2 mL/min,柱温35 ℃,检测波长为238 nm。结果维生素B1在浓度1.0~5.0 μg/mL浓度范围内线性关系良好(Y=294 400.5X-65 837.9,r=0.997 9),方法回收率为88%~92%,重现性在RSD=0.8%~1.24%(n=5)。结论本测定方法准确、可靠,重复性好,可用于测定酵母菌细胞内维生素B1含量。
酵母菌;维生素B1;HPLC
酵母是一种可食用的、营养丰富的单细胞微生物,含有较多的蛋白质(占细胞干重的40%~60%),消化吸收率很高,酵母蛋白质中富含人体必需的8种氨基酸,特别是谷物中含量较少的赖氨酸含量较高[1-3]。酵母中氨基酸的组成比例接近联合国粮农组织(FAO)推荐的理想氨基酸组成,由于酵母菌体中富含维生素B1,其含量高于某些蔬菜、水果、鸡蛋、鱼、肉,且含有海藻糖、辅酶A等特殊疗效物质,而近年来新兴开发的一些食用酵母可在人体内很快被吸收与利用,所以研究酵母菌体内维生素B1有很大的经济价值与应用前景[4-6]。维生素 B1的测定方法已有很多报道,如荧光目测法、荧光计法、紫外分光光度法及偶氮染料比色法等,然而这些方法大多数耗费时间长,操作繁琐,不确定因素较多[7-9]。因此本文采用HPLC法对酵母菌细胞内维生素B1含量进行测定,为研究酵母菌体内维生素B1含量测定方法提供了依据。
1 实验材料
菌种实验采用了酵母TY-3 ......
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