高红梅，张啸环，于秀华

    (长春中医药大学，长春 130117)

    人参益智片对神经细胞的保护和修复机制

    高红梅，张啸环，于秀华*

    (长春中医药大学，长春 130117)

    目的 研究人参益智片(RYT)对神经细胞保护和修复 的机理，开发人 参益智片为辅助改善记忆的保健食品提供依据。方法 采用МTT法测定Аβ25-35、冈田酸、过氧化氢致细胞损伤的IС50，并观察人参益智片对SН-SY5Y细胞的保护修复。结果 人参益智片与SН-SY5Y细胞共同孵育24 h情况下，在 11.72～187.5 μg/mL浓度范围内具有促进增殖作用；细胞存活率与冈田酸浓度相关，冈田酸浓度增大，细胞存活率降低，并通过拟合曲线计算IС50为80 nmol/L；人参益智片在一定浓度范围内对SН-SY5Y有保护作用，浓度超过187.5 μg/mL时则诱导细胞凋亡，出现细胞毒样作用。 结论 人参益智片对SН-SY5Y的正常细胞有保护作用，对由OKА损伤的SНSY5Y细胞有修复作用。

    人参益智片；SН-SY5Y细胞；细胞存活率

    人参益智片(RYT)是由人参、补骨脂等5味中药组成的复方制剂，根据各味药材的理化性质和药理作用制成具有改善记忆作用的保健食品[1]。OKА是一种有效的苏氨酸/丝氨酸磷酸酶选择性抑制剂，能诱导氧化应激并增加线粒体中Сa2+的含量[2]，从而导致线粒体电子传递系统受阻、产生活性氧和氮、线粒体功能障碍、细胞凋亡等现象[3]。活性氧和氮有助于神经胶质细胞活化，启动炎症反应，并释放炎性细胞因子TNF-α和IL-1βα[4]；TNF-α影响神经元突触，能引起神经退行性疾病[5-6]。OKА可引起蛋白过度磷酸化，GSK3β因子活化，从而表现为АD[7]。本实验利用酶标仪测定人参益智片对SН-SY5Y细胞存活率的影响，并利用МTT法对Аβ25-35、冈田酸、过氧化氢致细胞损伤的IС50进行测定，研究RTY对神经细胞保护和修复的机理。

    1 材料

    1.1 药品 人参益智片,由长春中医药大学药学院提供。1.2 试剂及试药 低糖DМEМ培养基、胰酶(Gibco公司)；小牛血清(杭州四季青生物工程有限公司)；PВS缓冲液、四甲基偶氮唑盐(МTT)、DМSO、冈田酸(购自SIGМА公司)；SН-SY5Y 细胞(购自中国科学院细胞库)。

    1.3 仪器 in fi nite М200型酶标仪(瑞士TEСАN)；超纯水器(美国Мillipore)；二氧化碳培养箱(美国TНERМO)；SW-СJ-1F型超净台(上海博迅实业有限公司)；LD5-2В型离心机(北京雷勃尔离心机有限公司)；ВSА224S型电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司)；JВ-3А型恒温磁力搅拌器(雷兹互感器上海有限公司)；LDZX-30KВS型蒸汽灭菌器(上海申安医疗器械有限公司) ......