李兴月，张 楠，翁丽丽，邱智东，张 强

    (长春中医药大学，长春 130117)

    不同提取方法对哈蟆油中雌二醇含量的影响

    李兴月，张 楠，翁丽丽，邱智东，张 强*

    (长春中医药大学，长春 130117)

    目的 利用3种不同方法提取哈蟆油中雌二醇并测定其相应雌二醇含量，优选出提取哈蟆油中雌二醇最佳方法。方法 采用ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为磷酸水-乙腈-甲醇(63:32:5)；检测波长：280 nm；柱温：30 ℃；流速：1.0 mL/min。结果 90%乙醇提取法中雌二醇含量为7.5 μg/g，超临界提取法中(无夹带剂)雌二醇含量为1.25 μg/g，超临界提取法中(有夹带剂)雌二醇为0.83 μg/g。结论 利用90%乙醇提取哈蟆油中雌二醇方法最佳。

    哈蟆油；雌二醇；超临界二氧化碳流体萃取

    哈蟆油(ovlductus ranae)系蛙科动物中国林蛙(rana temporaria chensitumsis darid.)雌蛙的干燥输卵管。哈蟆油味甘、咸，性平，归肺、肾经，具补肾益精、养阴润肺生津的功效[1-6]。哈蟆油中含有雌二醇，雌二醇除了可以缓解由于年龄增加，身体机能下降而引起的雌激素分泌不足之外，对肌体的生长、代谢、发育、繁殖还起到重要的调节作用[7]。哈蟆油在作为治疗心脑血管疾病、肝病、贫血、癌症等疾病的辅助用药方面，可以增强人体免疫力，提供高蛋白营养物质，对减肥节食者大有好处，是临床常用营养保健品[8]。本研究采用不同提取方法，测定相应提取方法中雌二醇含量，筛选出最佳提取方法，为哈蟆油的进一步研究与开发提供理论依据。

    1 仪器与材料

    1.1 仪器 岛津高效液相色谱仪Prominence-ILC-2030(岛津企业管理中国有限公司)；JA2603B万分之一天平(上海天美天平仪器有限公司)；FA1004B十万分之一天平(上海佑科仪器仪表有限公司)；水浴锅HH-S2(上海越众仪器设备有限公司)；旋转薄膜蒸发仪(上海申顺生物科技有限公司)；全自动超纯水机(上海富诗特仪器设备有限公司)；超临界二氧化碳流体萃取仪(杭州明凯科技有限公司)。

    1.2 试药 雌二醇(规格：100 mg，购于中国食品药品鉴定所)；95%乙醇(500 mL，分析纯，北京化工厂)；丙酮(500 mL，分析纯，北京化工厂)；甲醇(500 mL ......