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编号:974981
人参蛋白的提取和体外免疫调节活性研究
http://www.100md.com 2018年6月19日 长春中医药大学学报 2018年第3期
试剂盒,1材料与方法,2结果,3讨论
     王钰莹,闫福源,闫凯丽,王任晶,许 宁,王丹阳,汪 莹,何慧楠,刘 莉

    (长春中医药大学药学院,长春 130117)

    人参为五加科植物人参(Panax ginseng C. A.Meyer.)的干燥根及根茎。人参被人们视为百草之王,具有大补元气、补脾益肺、生津止渴等功效[1]。人参具有多种化学成分,主要包括皂苷类、挥发油类、氨基酸类、脂肪酸类、糖类、蛋白质及多肽、无机盐类等[2-6]。现代药理学研究[7-9]表明,人参具有免疫调节、抗氧化、抗肿瘤、抗辐射、降血糖等活性,并对其他药理活性起着协同调节作用。人参皂苷被认为是人参的主要活性成分,近年来的研究[10-13]表明,人参多糖,人参蛋白等大分子也具有明显的生物活性。本研究针对人参当中的大分子物质蛋白质进行提取和性质检测,并以小鼠巨噬细胞为研究对象,对人参蛋白体外的免疫调剂活性进行初步的探索研究,为把人参蛋白开发成保健食品的原料提供科学的依据。

    1 材料与方法

    1.1 试剂与仪器 DMEM培养基,购于Gibco公司;MTT(噻唑蓝),购于Thiazoly公司;DMSO,国药集团化学试剂北京有限公司;PGE2酶联免疫测定试剂盒、TNF-α酶联免疫测定试剂盒,购自上海朗顿生物科技有限公司;脂多糖(LPS)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、十二烷基磺酸钠(SDS) 均购于 Sigma 公司;Infinite 200 Pro型酶联免疫检测仪,购自瑞士TECAN公司,3111型CO2培养箱购自Thermo Forma公司。

    1.2 细胞株 小鼠巨噬细胞样细胞株 RAW 264.7(ATCCTIB-71),购自武汉普诺赛生物技术公司。

    1.3 实验方法

    1.3.1 人参蛋白的提取 称洗净鲜人参500 g,加入浓度为0.01 mol/L,pH 7.4的Tris-HCl缓冲溶液5 000 mL,匀浆,4 ℃ 浸提,每隔1 h用0.01 mol/L的Tris溶液调节pH至中性 ......

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