高云鹏，赵 雨，王思明，刘美辰，王佳雯

    (长春中医药大学中医药与生物工程研究开发中心，长春 130117)

    目前，多个物种的Cu/Zn SOD已经被克隆出来，并在大肠杆菌、酵母、烟草和昆虫细胞等系统中得到了表达[1-11]。人参SOD广泛应用于多个领域，尤其是化妆品行业。人参Cu/Zn SOD基因已经被发现并且在大肠杆菌中完成了表达，但是大部分蛋白是以包涵体形式存在的，给纯化带来了一定的困难[12]。本次研究通过优化诱导条件和诱导成分，获得了可溶性表达的人参SOD蛋白，表达率略高于文献，可溶性表达可以是纯化过程简化，省略了变性复性过程，保持蛋白天然构象和活性，未纯化的粗酶即有SOD的活性，为大规模生产人参SOD重组蛋白及研究人参SOD生物学功能奠定了基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验材料 原核表达载体pET-30α、pMD18T-pgSOD质粒由本实验室保存。 E.coli DH5α菌株、E.coli BL21菌株购自碧云天公司，保存于- 80 ℃。限制性内切酶、DNA连接酶、胶回收试剂盒及质粒提取试剂盒等购自TaKaRa公司；

    1.1.2 试剂 IPTG购自Sigma；SOD检测试剂盒购自南京建成；其他生化试剂均为国产分析纯或进口分装试剂。

    1.1.3 仪器 离心机(eppendorf centrifuge 5804R-德国) ......