黄芩苷对大鼠结肠成纤维细胞增殖及TGF-β1、CTGF表达的影响
药组,抑制率,1材料与方法,2结果,3讨论
娄石磊,苗永迪,岂 蕊,治丁铭,孙 聪(长春中医药大学,长春 130117)
肠纤维化是克罗恩病(CD)、溃疡性结肠炎(UC)和辐射性肠炎等多种炎症性肠病(IBD)的并发症之一。其病因主要由肠道炎症损伤修复失调和肠间质细胞过度增殖,进而导致大量的细胞外基质(ECM)沉积于肠壁,产生肠道纤维化、肠道狭窄和肠梗阻等严重后果[1-2]。随着肠纤维化研究的不断深入,成纤维细胞的功能及相应的细胞信号转导机制研究已经成为重点。黄芩苷(baicailin,C21H18011),是从唇形科植物黄芩(scutellaria baicalensis georgi)的干燥根中提取的一种黄酮类化合物。近年来,动物实验和临床研究均证实,黄芩苷具有抗纤维化及器官保护作用[3-5]。本课题组采用MTT法、ELISA和Western blotting等技术,研究黄芩苷对体外结肠成纤维细胞增殖影响和相关蛋白表达水平的变化,探究其可能的作用机制。
1 材料与方法
1.1 细胞、药品及主要试剂 大鼠结肠成纤维细胞,由长春中医药大学生物化学实验室提供。黄芩苷由中国兽医药品检查所提供,批号Z0271504。地塞米松磷酸钠由中国药品生物制品检定所提供,批号2Q3W-614V。高糖DMED干粉(美国Gibco公司),胎牛血清(上海依科赛生物公司),胰蛋白酶1:250(美国GenView公司),噻唑蓝(美国GenView公司),二甲基亚砜(北京索莱宝生物公司),Rat TGF-β1(LAP)Uncoated ELISA Kit(美国 Invitrogen公司),TGF-β1 polyclonal antibody和CTGF polyclonal antibody( 美 国Bioworld公司) ......
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