Box-Behnken效应面法优化板蓝根总黄酮的超声提取工艺及其抗氧化活性研究
响应值,1材料,2方法,3结果,4讨论
梁艳妮,朱 佳,唐志书,孙晓春,刘世军,宋忠兴,王 征(陕西中医药大学/陕西省中药资源产业化协同创新中心,陕西省中药基础与新药研究重点实验室,陕西 咸阳 712083)
板蓝根为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根,主产于江苏、河北,具有清热解毒、凉血利咽作用[1]。临床常用于温疫时毒,发热咽痛、流行性感冒、腮腺炎、急性扁桃体炎等病症,具有抗病毒、抗菌、抗炎、镇痛等药理作用[2]。板蓝根证实含有生物碱、木质素、神经酰胺、黄酮、有机酸类、蒽醌类、芥子苷类等近百个化合物[3-6]。有关板蓝根总生物碱及多糖的提取工艺研究较多[7-8],但对于板蓝根黄酮的提取工艺研究仅有一篇[9]。黄酮类化合物因具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒等多种生物活性受到广泛关注[10]。超声波提取法具有能耗低、效率高和不破坏黄酮分子结构等优点[10-11]。Box-Behnken效应面法采用多项式拟合各因素与响应值之间的函数关系,比正交实验设计结果更优良[12-13]。本实验拟通过单因素试验与响应面分析法优化板蓝根总黄酮的超声乙醇提取工艺,为板蓝根总黄酮的药理活性研究与开发提供参考。
1 材料
板蓝根(批号:20171101,产地河北)为十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort.的干燥根,购于陕西兴盛德药业有限责任公司,由陕西中医药大学王继涛高级实验师鉴定。芦丁对照品(批号:wkq16031602,纯度:HPLC≥98%),购自四川省维克奇生物科技有限公司;所用试剂均为分析纯,水为娃哈哈纯净水。
UV-2600型紫外分光光度计(日本岛津公司);KQ-300DE型数控超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司);GB204 型电子天平(瑞士梅特勒-托利多公司);FA2004B型万分之一电子天平(上海佑科仪器仪表有限公司);VaCo5低温冷冻干燥仪(Zibrus Technology);HH-2型恒温水浴锅(北京科伟永兴仪器有限公司);FE-1000AD固体粉碎机(天津鑫博得仪器有限公司)。
2 方法
2.1 标准曲线的制作 以芦丁为对照品采用亚硝酸钠-硝酸铝法绘制标准曲线[14]。即精密称取芦丁对照品适量,60%乙醇溶解配制200 μg/mL的芦丁对照品溶液。精密量取1 mL,2 mL,4 mL ......
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