何其英，柳红芳

    (北京中医药大学东直门医院，北京 100700)

    DN是终末期肾病发生的主要病因之一[1]，而肾间 质纤维化是影响肾功能的关键因素[2]。有研究[3]表明，早期糖尿病大鼠即可出现肾间质纤维化的改变。TGF-β1-Smad2/3信号通路在DN肾间质纤维化的发生中占有重要地位。现代研究表明，蛋白尿是导致肾脏纤维化发生的独立因素，也是DN进展的重要因素。课题组前期临床研究显示，芪地糖肾颗粒降低尿蛋白水平与西药缬沙坦是等效的，但其具体作用机制不明确[4]。本论文基于TGF-β1-Smad2/3信号通路探讨芪地糖肾颗粒防治DN大鼠肾间质纤维化的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料 健康雄性Wistar大鼠(SPF清洁级)70只，体质量180～200 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证编号：SCXK(京)2012-0001。芪地糖肾颗粒(熟地黄、生黄芪、芡实、山萸肉、水蛭、熟大黄等)由涿州东乐制药公司提供。缬沙坦胶囊(商品名：代文)由北京诺华制药有限公司提供，规格80 mg×7片。链脲佐菌素(Streptozocin，STZ；美国 Sigma公司)。尿微量白蛋白ELISA 试剂盒(美国 R&D Systems公司)。Anti-TGF beta 1抗体(ab92486)、Anti-Smad2(phospho S467) 抗 体(ab53100)、Anti-Smad3抗体- ChIP Grade(ab28379)(购于美国ABC公司)。

    1.2 造模方法 1)大鼠经普通饲料适应性饲养1周后，选择健康、状态良好并检测血糖正常的大鼠列入观察。2)按随机分组法分为对照组10只、造模组60只。所有组禁食12 h，将造模组大鼠予单次腹腔注射STZ 55 mg/kg(STZ 临用前溶解于0.1 mol/L、pH4.5 的柠檬酸盐缓冲液) ......