马 莉，王佳惠，毛 靖，苏立林，李秀娟，张 良

    (1.黑龙江中医药大学附属第一医院，哈尔滨 150040；2.黑龙江中医药大学研究生院，哈尔滨 150040；3.黑龙江中医药大学附属第二医院，哈尔滨 150040)

    血管性痴呆(vascular dementia，VD)可定义为与血管性脑损伤相关的神经退行性疾病，主要表现为认知能力下降和记忆力减退[1]。据报道，随着人口老龄化和脑血管疾病风险的增加，全球痴呆患者的数量将在2030年达到6 600万，在2050年达到1.2亿。VD发病率仅次于阿尔茨海默氏病，约占所有痴呆的15%～20%[2]。目前对VD的发病机制尚未完全阐明，可能与神经生化机制、细胞和分子机制、炎性反应及遗传等机制相关，而炎性反应机制在急性脑缺血后继发性神经损伤中起主要作用[3]。沉默信息调节蛋白1(silent information regulator 1，SIRT1)在海马神经元内表达丰富，是细胞内信号传导网络的关键靶点，SIRT1通过去乙酰化作用抑制核转录因子κB(NF-κB)炎性信号传导，在调控血管性认知功能障碍以及细胞凋亡方面起着重要作用[4]。因而本研究拟通过改良的2-VO法制作VD模型，探讨VD发展过程中认知功能障碍的病理变化和可能的分子生物学机制。

    1 材料方法

    1.1 实验动物

    选用纯系Wistar健康雄性大鼠60只，体质量为(250±30)g，均由黑龙江中医药大学实验动物中心提供。

    1.2 主要实验试剂与仪器

    TGL—16G 冷冻离心机(上海安亭科学仪器厂)；生物显微镜(日本OLYMPUS公司)；电动玻璃匀浆机(宁波新芝科学仪器研究所)；一次性无菌针灸针(苏州医疗用品厂有限公司；规 格：0.20 mm×13 mm)；KWD—808I脉 冲电疗仪(常州市武进长城医疗器械有限公司)；Morris水迷宫系统。抗SIRT1抗体、抗NF-κB p65抗体、抗β-actin抗体；BCA蛋白定量试剂盒；ECL化学发光试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)。

    1.3 模型制备及分组

    60只Wistar大鼠随机分为4组，每组各15只，分别为：假手术组、模型组、西药组和电针组。实验动物在实验室进行1周适应性训练后，应用改良2-VO阻断法进行造模。各组大鼠采用腹腔注射10%水合氯醛，按照0.35 mL·100 g-1的计量进行麻醉，仰卧位固定头部和四肢，颈部备皮消毒铺巾，在颈部正中行切口，充分暴露两侧颈总动脉 ......