孙玉婷，刘明晖，方 爽，王长宏*

    (1.吉林大学中日联谊医院，长春 130033；2.中国人民解放军联勤保障部队第九六五医院，吉林 吉林 132011)

    胃溃疡(gastric ulcer, GU)是消化系统常见疾病，其发病与病原体感染、非甾体类药物和心理因素等相关[1-2]。近来研究发现氧化应激参与了GU的形成，GU发生的高危因素中，如HP感染[3]、NSAIDs损伤[4]、乙醇破坏[5]，有ROS的产生参与。当体内的活性氧簇(ROS)的过度产生破坏细胞内源性氧化平衡后，就会发生氧化应激应答[6-7]。Keap1/Nrf2/ARE 是目前研究较热门的抗氧化信号通路之一，Nrf2是维持细胞内氧化平衡的重要转录因子，当机体受到大量ROS刺激时，Nrf2会与Keap1分离，游离状态下的Nrf2会进入到细胞核内，与抗氧化元件ARE结合，启动很多下游的抗氧化基因和解毒基因的激活转录，如血红素氧合酶-1(HO-1)、醌氧化还原酶-1(NQO1)等，从而发挥清除氧自由基、抑制细胞凋亡等作用，避免机体免到受氧化损伤[8-9]。因此我们可以通过调节氧化机制来改善治疗GU。

    四君子汤出自宋代《太平惠民和剂局方》，由人参、茯苓、白术、炙甘草组成。在临床上治疗消化道溃疡(PU)、慢性胃炎、消化不良等疾病，在治疗安全性、降低西药副作用以及减少复发率方面[10-11]，都被证实有良好的效果。但四君子汤治疗GU是否可以通过激活Nrf2信号通路，调节氧化应激来达到治疗GU的效果尚不明确。本研究主要通过体外实验，利用乙醇诱导胃黏膜上皮细胞GES-1细胞氧化损伤，检测氧化调节因子Nrf2及其下游调控的HO1、NQO1的表达量，从而来探究SJZD保护胃黏膜的抗氧化作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 试剂和材料

    1)四君子汤：药物均经专家鉴定符合药典要求，按照人参12 g，茯苓12 g，白术12 g，炙甘草8 g，药物来源及药液制作方法参考如下[12]，制备母液浓度为1 g·mL-1，浓缩后配制含生药2 000 mg·mL-1、1 000 mg·mL-1、500 mg·mL-1、100 mg·mL-1、50 mg·mL-1药液备用。2)试剂：RPMI-1640培养基、胎牛血清购自赛默飞世尔科技有限公司；青霉素链霉素双抗、显影液、0.22 μm PVDF膜、RIPA细胞裂解液、蛋白酶抑制剂购自碧云天生物技术有限公司；SYBR?Premix Ex Taq? II购自宝日医生物技术有限公司 ......