朱 栋，许金海，莫 文

    (上海中医药大学附属龙华医院骨伤科，上海 200032)

    鹿灵活络合剂为本院治疗CSR的自制药剂，基于石筱山经验方配制而成，具有益气活血，祛瘀止痛等功效，前期研究证实能有效缓解CSR症状[1]。为解决合剂在配制及临床使用中的不便，本院进一步改良工艺完成鹿灵活络颗粒的配制，并在医院中大量使用，截至目前未见不良反应。本研究在前期研究基础上建立CSR大鼠模型，基于磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)通路初步分析鹿灵活络颗粒治疗CSR的药理机制。

    1 材料和方法

    1.1 动物

    48只SD雄性大鼠，体质量(180±20)g，购自上海甲干生物科技有限公司，合格证号[SCXK(沪)2020-0006]。购入后在上海中医药大学龙华医院实验中心动物房中饲养1周[SYXK(沪)2018-0036]，以适应环境。

    1.2 药物、试剂和仪器

    鹿灵活络颗粒(本院自制药，沪药制备字Z20200065000)；莫比可(即美洛昔康片，上海勃林格殷格翰药业公司)；多聚甲醛、HE试剂、大鼠白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、环氧合酶2(COX2)、前列腺素2(PEG2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA试剂盒(上海生工公司)；p-Akt、GAPDH、PI3K、Akt抗体、HRP二抗(Abcam公司)；组织研磨器(宁波新芝生物科技公司)；普通显微镜(Leica公司)；电泳仪器(BioRad公司)，酶标仪(Thermo公司)等。

    1.3 方法

    1.3.1 造模及给药处理 造模前观察大鼠步态均正常。禁食不禁水12 h后，随机选取40只大鼠麻醉，采用本院新创的颈前锁骨下入路椎管外臂丛神经压迫法[2]构建CSR大鼠模型。具体为：腹腔麻醉(戊巴比妥钠35 mg·kg-1)后俯卧位固定大鼠 ......