焦 谊，刘志凤，于天源*，张英琦，刘 迪,2，王厚融，徐亚静，官 乾

    (1.北京中医药大学，北京 102488；2.北京中医药大学东方医院，北京 100078)

    发热作为儿科常见的症状之一，发生率为25.7%，每人每年约0.8次[1]。长期发热或体温过高则会损害机体调节功能，使病情恶化。小儿推拿退热具有安全性和有效性[2]，其中以开天门[3]、推坎宫[3]、揉太阳[3]、揉耳后高骨[4]、清天河水[5]、推脊[6]手法最为常用。但小儿推拿退热的最适年龄、最适温度、最适类型等标准，研究不够深入。故选取脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)模型模拟临床细菌性发热，选取不同月龄幼兔模拟不同年龄患儿，明确推拿退热的最适年龄，并进一步选取最适年龄幼兔探究推拿退热的机理。

    视前区-下丘脑前部(POAH)是体温调节的基本中枢，也是最重要的体温调节中枢，LPS作为Toll样受体4(TLR4)公认的配体，能刺激机体产生炎症反应，核转录因子kappaB(NF-κB)参与机体免疫调节、炎症反应、感染、细胞周期调控、细胞分化及凋亡等[2]，发热过程以炎症介质如肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白细胞介素IL-1β(interleukin-1β，IL-1β)最为重要，故以退热六法为例，设计实验进行深入研究。

    1 材料及方法

    1.1 实验动物及分组

    清洁级1、3月龄新西兰雄兔各16只，2月龄新西兰雄兔24只，肛温(39.00±0.50)℃，购自北京隆安实验动物养殖中心[合格证号为SCXK(京)2019-0006]。饲养于北京中医药大学动物实验室，温度(25±0.5)℃，相对湿度(65±5)%，12h/12h明暗周期，自由饮食饮水。适应性饲养3天，排除肛温波动大于0.4℃的新西兰兔。随机将1、3月龄幼兔分为模型组8只、推拿组8只，2月龄幼兔随机分为正常组8只、模型组8只、推拿组8只。实验程序经北京中医药大学动物使用和管理委员会批准，符合动物福利与伦理原则。

    1.2 主要器材及试剂

    1.2.1 主要器材及仪器 MultiSkan3酶标仪(美国THERMO公司)；冷冻离心机(德国EPPENDORF公司)；BL-420N(成都泰盟软件有限公司)；Bio Drop (Biochrom公 司)；T100TM Thermal Cycler PCR仪、CFX ConnectTMReal-Time System定 量PCR仪、ChemiDoc MP成像仪(美国BIO-RAD公司) ......