钟远坚，杨玉婷，潘 可，王 刚，赵立春,

    (1.广西中医药大学药学院，南宁 530200；2.广西壮瑶药工程技术研究中心，南宁 530200)

    本实验采用回流提取法，以“荔止痛方”中治疗睾丸炎功效成分原儿茶酸、柠檬苦素、车叶草苷及干膏收率为指标，选用单因素考察法、中心组合设计-效应面法结合信息熵权法对指标数据进行权重分析，并且对主要的影响因素：溶剂倍数、提取时间、浸泡时间以及提取次数进行优选，力图建立一个稳定、可靠、最优的“荔止痛方”生产提取工艺，在保证其功效的基础上为后续“荔止痛方”治疗睾丸炎研究提供依据[1-2]。

    1 设备与材料

    1.1 仪器

    Waster2695型高效液相色谱仪(美国Waters公司)； PX124ZH 型电子分析天平 [奥豪斯仪器(常州)有限公司]；HC-1000Y型多功能粉碎机(浙江省永康市天祺盛世工贸有限公司)；PL-S80T型康士杰超声波清洗机(东莞康士洁超声波科技有限公司)；DZTW调温电热套(北京市永光医疗仪器有限公司)。

    1.2 试药

    原儿茶酸(批号：MUST-1710908，含有量99.32%)、柠檬苦素(批号：MUST-17030620，含有量99.39%)、车叶草苷(批号：AF9112301,含有量99.78%)(成都埃法生物科技有限公司)；乙腈为色谱纯(美国Fisher Chemical公司)；其他试剂均为市售分析纯。

    2 方法与结果

    2.1 原儿茶酸、柠檬苦素以及车叶草苷含有量测定

    2.1.1 对照品母液配制 精密称取原儿茶酸、柠檬苦素、车叶草苷对照品适量，分别置于10 mL棕色量瓶中，用甲醇溶解并定容，即得(三者质量浓度分别为1.040 mg·mL-1、1.050 mg·mL-1、1.10 mg·mL-1)。

    2.1.2 供试液配制 称取“荔止痛方”全方药材，共45 g，置于烧瓶中，加水浸泡后，加热回流提取2次后，合并滤液后，用200目滤布过滤，离心10 000 rpm，3 min；过0.22 μm微孔滤膜，取续滤液，即得。

    2.1.3 色谱条件 Agilent C18色谱柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)；流动相：乙腈～0.1%磷酸；体积流量1.0 mL·min-1；进样量：10 μL；检测波长：260 nm(0～25 min)、239 nm(26～70 min)、203 nm(71～120 min)；柱温：30 ℃ ......