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编号:223122
止痛消结散对小鼠肿瘤细胞与DRG神经元共培养模型TRPV1表达的影响
http://www.100md.com 2022年12月10日 长春中医药大学学报 2022年第12期
癌痛,1材料与方法,1细胞,2药物及主要试剂,3主要仪器,4止痛消结散浸提液制备,5肿瘤细胞与DRG神经元细胞共培养模型建立及分组,6酶联免疫吸附测定(ELISA)检测上清液中IL-6的表达
     郭玉玉,胡佳佳,郁沙莎,翟笑枫

    (中国人民解放军海军军医大学第一附属医院中医肿瘤科,上海 200083)

    癌痛(癌性疼痛)特指由肿瘤直接浸润神经根、神经干、神经丛或者神经,累及空腔及实质器官,诱发局部坏死、炎症等,引起疼痛,常伴有牵涉痛,对恶性肿瘤患者的生活和生存质量产生了严重的影响,为目前发生率最高和最难耐受的临床症状之一,同时也是治疗恶性肿瘤的重要组成部分。目前,世界卫生组织已经将癌痛全面纳入癌症综合规划治疗内容之中[1]。

    背根神经节(DRG)神经元是靠近椎间孔内侧的脊髓背根肿胀结节,接收来自身体受体的所有神经冲动,包括疼痛。目前的研究[2]表明,与疼痛传递密切相关的膜通道辣椒素受体1,也称为TRPV1受体(TRPV1),是一种对Ca+具有高度亲和力的非选择性阳离子通道,它在多感觉伤害感受器中表达,并介导多种急性和持续性疼痛,如外周和中枢神经系统炎性疼痛和癌症疼痛,在调节疼痛方面发挥重要作用。有文献[3]证明,Lewis肺癌细胞晚期骨转移后,感觉神经纤维上TRPV1受体被局部酸性肿瘤微环境激活,进而诱导骨骼感觉神经产生,导致骨痛的发生。基于此,本研究通过实验建立肿瘤细胞与DRG神经元共培养模型以及药物干预模型,探讨止痛消结散的止痛作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞

    小鼠背根神经节神经元细胞、A549细胞,购自无锡菩禾生物医药技术有限公司。

    1.2 药物及主要试剂

    止痛消结散,上海雷允上药业有限公司。Trizol(invitrogen);DEPC处理水(购自Sigma);氯仿/异丙醇/无水乙醇(购自上海国药);SYBRGreen PCR试剂盒(型号Thermo F-415XL);逆转录试剂盒(型号Thermo K1622)。

    1.3 主要仪器

    低温冷冻离心机(型号Sigma 3K15);Realtime检测仪(型号ABI-7500);光学显微镜(型号XDS-1A);电泳仪(购自BIO-RAD 公司 ......

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