沈文婷，秦建品，许 诣

    (湖北文理学院附属医院/襄阳市中心医院儿科，湖北 襄阳 441021)

    气道平滑肌细胞(ASMCs)的增殖和分泌物的增加已被认为是哮喘等阻塞性肺疾病的致病因素，其过度增殖可导致气道阻塞和支气管收缩障碍，目前为止还没有能够有效抑制其增殖的方法[1]。因此有必要研究抑制ASMCs增殖的机制。细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinase 1/2，ERK1/2)在哮喘中的激活是ASMCs细胞增殖和气道重塑的主要调节剂，抑制其激活可抑制ASMCs细胞增殖和减缓气道重塑[2-3]。微小RNA(miRNA)可通过与mRNA 3'-UTR中互补位点相互作用来负向调控mRNA的表达，大量研究[4]已表明，miRNA在哮喘等气道炎症疾病中具有重要作用。研究[5]表明miR-339可通过靶向抑制FGF信号传导途径从而抑制肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的增殖，但miR-339是否同样影响气道平滑肌细胞的增殖还未可知。在大肠癌中，miR-339-5p可通过抑制p-ERK1/2表达发挥抑制癌细胞生长的作用[6]，但其在ASMCs是否能调控ERK1/2通路还未见报道。因此本研究探究了其对气道平滑肌细胞增殖及ERK1/2通路的影响，以期为研究抑制ASMCs细胞增殖的作用机制提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 试剂

    BCA蛋白检测试剂盒、MTT检测试剂盒、HRP标记的山羊抗兔IgG二抗抗体、PD98059(货号：K12862、BTN111105、WE0381-QAN、M00029-XJT)购自北京百奥莱博科技有限公司；FITC标记的羊抗兔IgG(货号：0295G-FITC)购自上海雅吉生物科技有限公司；兔抗β-actin、Phospho-p44/42 MAPK (Erk1/2)、p44/42 MAPK (Erk1/2)、Caspase-3、Bax(货号：4970、9101、9102、9661、2772)购自Cell Signaling Technology；兔抗增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen，PCNA)、Bcl-2(货号：10205-2-AP、12789-1-AP)购自是Proteintech；兔抗c-Myc、CyclinD1抗体(货号：ab32072、ab16663) 购 自 abcam；Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection试剂盒(货号：A211-01/02)购自南京诺唯赞生物公司 ......