寨 旭，裴红红，刘 俊，丁新爱

    (西安交通大学第二附属医院急诊科，西安 710006)

    蛋白酪氨酸激酶2/信号转导与激活因子3(JAK2/STAT3)通路是常见的调节细胞炎症、侵袭和上皮间质转化(EMT)的通路[1]。研究[2]证实，JAK2/STAT3通路的失活能够减轻重症急性胰腺炎大鼠的炎症反应；而青蒿素抑制JAK2/STAT3通路激活促进肝癌细胞凋亡，发挥抗肿瘤作用[3]。因此，推测青蒿素通过JAK2/STAT3通路可改善急性胰腺炎损伤。本研究以雨蛙素诱导的AR42J细胞为研究对象，分析AR42J细胞的炎症反应、迁移、侵袭能力和EMT标志物的水平，为急性胰腺炎治疗提供新的理论方向。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞株 鼠胰腺炎腺泡(AR42J)细胞购自河南省工业微生物菌种工程技术研究中心。

    1.1.2 药品与试剂 青蒿素、雨蛙素、JAK2/STAT3通路抑制剂AG490和激动剂colivelin(上海源叶公司)；胎牛血清(FBS)、F12-K培养基(美国Gibco公司)；Transwell小室(美国Corning)；酶联免疫吸附试验(ELISA)检测试剂盒(杭州主诺生物技术有限公司)；细胞计数试剂盒(CCK-8)[西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司]；青-链霉素混合液、0.1%结晶紫水溶液、基质胶、4%甲醇(北京索莱宝科技有限公司)；胰酶细胞消化液、RIPA裂解液、磷酸盐缓冲溶液(PBS)、脱脂奶粉(上海碧云天生物技术有限公司)；鼠源[JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、N-钙粘蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)及β-actin一抗]、HP标记的山羊抗鼠IgG(二抗)(武汉三鹰公司)。

    1.1.3 仪器 H4-20kr型低温高速离心机24孔板转子(湖南可成仪器设备有限公司)；DMI1 LED型倒置显微镜(德国Leica)；Multiskan FC型酶标仪(赛默飞世尔科技)；311X型二氧化碳培养箱(赛默飞世尔科技)；DYX-1A型低负压吸引器(上海宝佳医疗器械有限公司)；Mini-PROTEAN?Tetra小型垂直电泳仪(美国BIO-RAD)；OI1000型凝胶成像系统(广州广仪仪器有限公司)；SK-L330-Pro型摇床[大龙兴创实验仪器(北京)股份公司]等 ......