黄 赫，赵文嘉，赵 磊，王若冰，包玉龙，范英兰，张 瑜，张洪瀛，甘 雨，朱竟赫*

    (1. 辽宁中医药大学附属第二医院医学检验中心，沈阳 110034；2. 辽宁省中医药研究院中药药理室，沈阳 110034；3. 辽宁省中医药研究院实验动物中心，沈阳 110034)

    TLR(Toll-like receptor)是识别细菌、病毒等病原体的关键受体[1-2]。TLR7 是TLR 家族中识别单链病毒RNA(ssRNA)的关键成员[1-3]。TLR7 通过MyD88 依赖的途径激活NF-κB，触发趋化因子和炎症细胞因子，并激活TGF-β 活化激酶1(TAK1)、IL-1 受体相关激酶(IRAK)和TNF 受体相关因子6(TRAF6)[4]。TLR7/MyD88信号通路既参与免疫调节，又能通过调节细胞因子调节睡眠功能。失眠属于影响人类生理和心理健康的常见疾病，其病因可分为实证和虚证所致。中医常采用实则泻之，虚则补之的治则。射干具有泻火、解毒、散血、消痰之功效，可对抗实证失眠。前期研究结果显示，射干制剂具有戊巴比妥钠协同作用等，然而其作用机制不十分明确。本研究从泻火安神的角度，应用分子生物学、行为学测量系统、脑电图技术和数理统计等手段与方法探讨射干制剂对PCPA 所致失眠症的影响及其可能的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    SD 大鼠，SPF 级，雌雄各半，体质量180 ～220 g，由辽宁长生生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(辽)2015-0001。动物饲养于辽宁天一技术有限公司[动物使用许可证号：SYXK(辽)2020-0005]，环境温度21 ～25℃，相对湿度40%～70%。

    1.2 药物与试剂

    射干提取物由辽宁中医药大学附属第二医院药学实验室提供，每粒胶囊含内容物0.30 g，1 g 内容物相当于0.33 g 提取物(批号：20200402)；朱砂安神丸由北京御生堂集团石家庄制药有限公司提供(批号：141007)；地西泮片由上海上药信谊药厂有限公司生产(批号：1420060)。对氯苯丙氨酸(PCPA)由SIGMA 公司生产(批号：SHBD9168V)；动物组织总RNA 提取试剂盒(带gDNA 清除柱)(货号RE-03014)购自成都福际生物科技有限公司；罗氏SYBR GREEN 染料(货号4913914001)购自罗氏公司。

    1.3 仪器设备

    EthoVision 大小鼠行为学系统，由NOLUDS公司提供；JJ2000B 电子天平 ......