韩丹阳，王晨莉，时美伶，苏兆铎，杜宝珍

    (北京市鼓楼中医医院肿瘤科，北京 100075)

    天然来源的多糖类药物在发挥抗肿瘤效果的同时，表现出低细胞毒性或无细胞毒性的显著优势[1]。研究[2]已经表明，多糖类药物能够通过激活巨噬细胞和产生炎症介质来调节免疫系统。提示多糖可能具有免疫保护的能力。亮菌口服液(Armillariella oral solution，AOS)作为拥有完全知识产权的中成药，亮菌多糖是其核心成份，临床上被用于改善慢性胃炎、肠炎的临床症状和体征[3]、放化疗引起的白细胞减少[4]和结直肠癌的抗肿瘤治疗[5]。尤其Cheng HR 等报道，亮菌多糖中的β-1，6-葡聚糖，即AAMP-A70，能激活巨噬细胞介导的免疫应答，并将促瘤的M2 型巨噬细胞转化为抑瘤的M1 型巨噬细胞，发挥抗肿瘤作用[6]。此外亮菌多糖还具有更高的利用率、更低的生产成本和更高的回收率，有利于在工业规模上的扩大生产。然而，亮菌多糖能否对结肠癌、黑色素瘤和肉瘤等恶性肿瘤是否有保护作尚未有报道。本研究分别从离体(采用人结肠癌细胞系HCT 116 细胞和鼠转移性黑色素瘤细胞系B16-F10 细胞)和在体(构建肉瘤荷瘤小鼠)两个层面，检测亮菌多糖的对结肠癌/黑色素瘤肿瘤细胞的毒性、抗增殖活性和对肉瘤荷瘤小鼠外周血的血小板计数、总白细胞计数、白细胞分型计数、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和尿素水平(UREA)的含量以及肝、肾、脾的组织病理学的影响。以期为亮菌口服液疗效的开发和临床合理用药提供参考。

    1 材料和方法

    1.1 实验动物

    选取6 ～8 周龄Balb/c 雌性小鼠24 只，随机分为对照组(Control 组)、低剂量组(亮菌多糖25 mg·kg-1)和高剂量组(亮菌多糖50 mg·kg-1)。小鼠平均体质量(28±2)g，购自北京维通利华公司[合格证号：SCXK(京)2014-0001]。饲养温度26 ～28℃，光照12 h，均自由采食和饮水，适应性喂养1 周后进行实验。本研究符合伦理学相关标准，且经我院医学伦理会审核批准(批号：20210503096)，并遵循了有关实验动物管理和使用的规定[7]。

    1.2 试剂及仪器

    亮菌口服溶液，购自四川先通药业有限责任公司(口服，1 次10 ～20 mL，每日3 次，国家准字号：H51023188，规格：10 mL，无糖型)。氢氧化钠、乙二胺四乙酸、半胱氨酸、木瓜蛋白酶、TRISHCl、EDTA (pH 7.4)、MTT [3-(4 ......