毕 正，鲁云霞，张银玉，李金菊，周 恒，吕溪娟，方朝晖

    (1. 安徽中医药大学，合肥 230012；2. 安徽医科大学，合肥 230031；3. 安徽中医药大学第一附属医院，合肥 230031)

    糖尿病流行病学调查研究[1]显示，我国糖尿病患者已超过1.5 亿人。糖尿病群体的不断扩大给疾病的防治带来新的挑战与要求。糖尿病患者中90%以上的患者都是2 型糖尿病[2]，而2 型糖尿病的病因极为复杂并且受多种因素的影响，其中长期过量进食引起的肥胖是2 型糖尿病发生发展的重要因素之一[3]。

    丹蛭降糖胶囊(Danzhi Jiangtang Capsule，DJC)是安徽中医药大学第一附属医院的一款院内制剂，用于2 型糖尿病患者的治疗已有30 年历史。课题组前期研究发现丹蛭降糖胶囊能够改善糖尿病患者的多食行为，具有降低体质量，调节血脂，降低BMI 指数等功效[4-6]。db/db 小鼠是是瘦素受体基因(Obese Gene Receptor，OB-R)纯合突变小鼠，具有“体质量快速增长，活动量少，高血脂，高血糖，高血压及肥胖等特点”，是模拟肥胖型2 型糖尿病的高保真动物模型[7]。本研究旨在观察丹蛭降糖胶囊对db/db 小鼠体质量及摄食量的干预作用及对下丘脑摄食中枢关键因子的调节作用进行研究。

    1 材料

    1.1 实验动物

    实验动物均购自江苏集萃药康集团，分别购入SPF 级雄性db/db 小鼠18 只及SPF 级雄性db/dm 小鼠9 只，周龄均为5 周，db/db 小鼠体质量在30 ～35 g 之间，db/dm 小鼠体质量在15 ～20 g 之间。动物到达后饲养于安徽医科大学中心动物房SPF 级动物房层流架，饲养环境维持12 h 昼夜交替，温度为(22±2)℃，湿度为50%～55%，动物自由摄食饮水，普通饲料喂养，均使用刨花垫料。本研究已通过安徽医科大学伦理委员会审批(伦理号：LLSC20200932)。

    我国是农业大国，对农机设备有很高的要求。随着农机总量的不断扩大，新的农机装备也在不断涌现，导致我国的农业生产方式逐渐由人畜生产力向机械生产力转移，基本上摆脱了几千年的劳动力作业形式，但是，这样势必会给整个农机安全监理带来巨大的压力和挑战。

    1.2 试剂与耗材

    血糖仪、 血糖试纸(Roche； 国械注进20142404948、国械注进20162402313)； Rabbit-Anti-AgRP Antibody(Abcam；ab254558)、Rabbit-Anti-α-MSH antibody (Bioss；bs-1848R)； 小 鼠α-MSH ELISA 试剂盒、小鼠AgRP ELISA 试剂盒、(晶美生物技术有限公司；96T；JM-12489M1、JM-13042M1)；免疫组化二步法试剂盒(中杉金桥；PV6000)；SweScript All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR(Servicebio；G3337-100)；EZ-10 总RNA 小量提取试剂盒[生工生物工程(上海)股份有限公司；B618583]；2X Universal SYBR Green Fast qPCR Mix(ABclonal；RK21203) ......