周 智，王孟清，罗银河，姚 冰，刘靖雷，马 啸，欧德飞，吴立毛

    (1.湖南中医药大学，长沙 410208；2.长沙市妇幼保健院，长沙 410007；3.湖南中医药大学第一附属医院，长沙 410021)

    支气管哮喘是以气道的炎症反应、重塑、高反应性为主要病理基础和表现的慢性疾病，哮喘主要的病理表现是气道炎症，其发病的关键机制为辅助性T 细胞1(Th1)/辅助性T 细胞2(Th2)介导的抗炎及促炎免疫应答失衡[1]，呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)对哮喘患儿Th1/Th2 细胞因子失衡影响显著[2]，也是诱发哮喘常见的病原体之一[3]，与学龄前儿童喘鸣和哮喘关系密切，严重影响儿童身心健康[4]。随着医学水平的不断发展和在分子生物学上研究的突破，微小RNA(mircroRNA，miRNA)在RSV 诱发哮喘疾病发展中的重要作用被越来越多的研究验证[5]。其中miRNA-144 与哮喘的发病机制密切相关，并在哮喘的发展过程中存在异常表达[6]。中医药在防治病毒诱发哮喘方面有独特优势，实验研究[7-9]证实：五虎汤可有效缓解RSV 诱发哮喘气道炎症，调节免疫平衡，但其机制仍未明朗。以儿童哮喘为例，本病分期辨证可分为发作期、迁延期和缓解期[10]。本研究以五虎汤治疗RSV 诱发哮喘急性发作期作为主要实验内容，以期进一步研究病毒诱发哮喘在生命早期的发病机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    本实验选用40 只购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司的SPF 级雄性C57 小鼠，年龄均为3 周，体质量15 ～18 g。实验动物许可证编号：SCXK(湖南)2019-0004。本实验经湖南中医药大学第一附属医院动物实验伦理委员会审核通过(伦理审批编号：zyfy20220820-04)。

    1.2 实验试剂和药物

    鸡卵清蛋白(ovalbumin, OVA)，Solarbio 公司生产，批号： 9006-59-1；RSV Long 株和 Hep-2 人喉癌上皮细胞，由武汉大学医学部病毒学研究所提供；miRNA 逆转录试剂盒(中国北京康为世纪，批号：CW2141)；mRNA 逆转录试剂盒(中国北京康为世纪，批号：CW2569)；Trizol(美国Thermo，批号：15596026)。利巴韦林(山东齐都药业有限公司，批号：102302003)；五虎汤方药组成：生石膏9.0 g，苦杏仁6.0 g，细茶叶4.8 g，麻黄2.4 g ......