张瑛琦

    (佳木斯市妇幼保健院，黑龙江 佳木斯 154003)

    卵巢癌是威胁女性生命安全的恶性肿瘤之一，由于早期临床症状较为隐匿，70%患者确诊时已处于晚期，中晚期卵巢癌5年生存率大于为40%，但大多数患者预后差且总体生存率低，为寻找早期诊断的潜在生物学标志物或治疗靶点，探究卵巢癌发展的机制是必须的[1-2]。作为一个由3’端与5’端连接形成的闭合环状RNA，环状RNA(circular RNA，circRNA)可以参与卵巢癌进展通过靶向微小RNA(miRNA)[3-4]。circ_0000515参与调控肿瘤发生过程。如，其在肝癌组织和细胞中高表达，它的高表达可预示淋巴转移的高发，并且体外研究指出其低表达能抑制肝癌细胞增殖和迁移，体内研究表明其能加重肝癌恶性进展[5]。生物信息学分析预测miR-924是circ_0000515的候选靶基因之一。证据已指出增加这个miRNA含量能够减弱肺癌细胞生长和运动能力[6]，提示miR-924介导肿瘤细胞特性。本研究运用SKOV3细胞分析circ_0000515是否通过靶向miR-924介导卵巢癌恶性表型。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂

    选取2020年3月—7月于佳木斯市妇幼保健院经病理学确诊的43例卵巢癌患者肿瘤和癌旁组织标本，并及时储存在-80℃，病人或其近亲属知情同意。

    SKOV3细胞、青霉素(100 μg·mL-1)，链霉素(100 μg·mL-1)购自上海奥陆生物；E-cadherin、N-cadherin抗体购自美国Santa Cruz；DMEM培养液购自上海碧云天生物；荧光定量PCR试剂盒、胎牛血清、荧光素酶检测盒、胰蛋白酶、Transwell小室购自北京索莱宝；Trizol与Lipofectamine? 3000购自美国Invitrogen；Matrigel基质胶购自北京索莱宝科技；GAPDH抗体与 IgG二抗购自美国CST；反转录试剂购自北京天根生化；CCK-8试剂购自上海酶研生物。

    1.2 实验方法

    1.2.1 实验分组 SKOV3细胞按照说明书培养在5% CO2培养箱内，用显微镜观察细胞生长密度，待其汇合度达到95%左右时 ......