心脑血管疾病与载脂蛋白E基因多态性及其血脂水平的相关性探究
【摘要】目的 探讨中国喀什地区心脑血管疾病与载脂蛋白E基因多态性及其血脂水平的相关性。方法 应用聚合酶链式反应(PCR)技术和限制性片段长度多态性(RFLP)及血脂检测技术，在195名正常对照人群和心脑血管疾病患者203例中观察其载脂蛋白E基因多态性的分布并记录血脂水平。结果 在受试人群中，ApoE基因多态性分布有所差异，ApoEε3在对照组中所占比例较多，而ApoEε2和ApoEε4则在实验组中所占比例较多，差异有统计学意义(P<0.05)。而在血脂水平上，甘油三酯在携带ApoEε2的患者中较高，总胆固醇在携带ApoEε4的患者中较高。结论 在中国喀什地区，载脂蛋白E2及E4等位基因在心脑血管疾病患者中的比例较高，在血脂上，ApoEε2与甘油三酯水平及ApoEε4与总胆固醇水平呈相关趋势，ApoEε2和ApoEε4可能是导致心脑血管疾病发病的危险因素。
【关键词】载脂蛋白E；基因多态性；心脑血管疾病；血脂
【中图分类号】R285.5 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2015.05.0.02
心脑血管疾病是由基因与环境因素交互作用形成的慢性疾病[1]。具有发病率高、死亡率高、复发率高、致残率高且并发症较多的特点，目前已对人们的生命健康产生了严重威胁，因此受到人们的高度重视。近年来，有研究表明，心脑血管疾病与载脂蛋白E结构密切相关，载脂蛋白E(Apoliporotein E，Apo E)有ε2、ε3、ε4三种常见等位基因和ε2/2，ε2/3，ε3/3，ε2/4，ε3/4，ε4/4六种基因型，是血浆中较为重要的载脂蛋白，本文就心脑血管疾病与载脂蛋白E基因多态性及其血脂指标进行了相关性探究。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2012年9月～2014年9月诊断为心脑血管疾病的住院患者203例为试验组，其中男108例，女95例，平均年龄(61.53±9.94)岁，正常人群195名为对照组，其中男98例，女97例，平均年龄(59.75±8.67)岁，两组患者的年龄、性别、文化程度等比较，差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 提取DNA
凌晨抽取患者静脉血2 mL，采用分离白细胞，低渗溶血，常规酚一氯仿法提取DNA，EDTA抗凝。
1.2.2 ApoE基因多态性检测
引物为：5’-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC-3’
5’-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA-3’[2]
PCR反应参数为：取PCR产物5 μL，加HhaⅠ酶3 U，37℃酶切5 h，用2%琼脂糖凝胶电泳分离酶切产物。结果可显示PCR产物为244bp，被酶切为91bp和83bp的片段为ε2基因，被酶切为91bp和48bp的片段为ε3基因，被酶切为72bp和48bp的片段为ε4基因。
1.2.3 血脂检测
所有血脂指标均用日立7170全自动生化仪分析测定。甘油三酯(TG)，血清总胆固醇(TC)采用终点法测定，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则采用酶法测定。
1.3 数据处理
采用SPSS 18.0统计学软件进行分析，各组基因型及等位基因比较采用x2检验，计量资料采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 ApoE基因多态性与心脑血管疾病的相关性
试验组和对照组中ApoE基因型及等位基因的频率分布与心脑血管疾病的关联性分析结果见表1、表2。结果表明，试验组相对于对照组ApoEε2和ApoEε4比例较高，ApoEε3比例较低，差异有统计学意义(P<0.05)。心脑血管疾病与ApoE基因多态性之间存在关联。
2.2 各血脂指标与ApoE基因多态性的相关性
试验组各项血脂指标均高于对照组，在试验组中ε4的TC水平及ε2的TG水平明显较高。说明在心脑血管患者中ε2可能有升高TG的作用，而ε4可能有升高TC的作用，差异有统计学意义(P<0.05)。
3 讨 论
心脑血管疾病是心血管疾病和脑血管疾病的统称，其发病原因十分复杂，在我国，近年来发病率呈上升趋势，被怀疑与饮食、运动及吸烟等不良习惯有关，随着生活水平的提高，盐、糖、脂肪的高摄入使人们患心脑血管疾病的危险性增加，体力劳动减少，体重增加，使之成为心脑血管疾病的患病因素。有研究表明，Apo基因多态性能够影响血脂水平，与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关[3]。
Apo基因多态性已发现20余种[4]，ApoE主要通过肝脏合成，位于19号染色体长臂13区2带[5]，是一种直接参与胆固醇代谢的蛋白[6]，现普遍认为，ApoE基因多态性可影响脂质代谢，并最终导致心脑血管疾病的发生，ApoE不同的基因型对血脂水平的影响也不同，所以本文应用聚合酶链式反应(PCR)技术和限制性片段长度多态性(RFLP)及血脂检测技术，对195例正常对照人群和203例心脑血管疾病患者进行了血脂水平的观察，并探究了心脑血管疾病与ApoE基因多态性及其血脂水平的关系。通过本次实验可得知，在中国黑龙江地区，载脂蛋白E2及E4等位基因在心脑血管疾病患者中的比例较高，具有相关性。在血脂水平上，ε2可能有升高患者TG的作用，而ε4可能有升高患者TC的作用。ApoEε2与甘油三酯水平及ApoEε4与总胆固醇水平具有相关性。可认为ApoEε2和ApoEε4可能是导致心脑血管疾病发病的危险因素。
参考文献
[1]马冠生，孔灵芝.中国居民营养与健康状况调查报告之九—2002行为和生活方式[M].北京：人民卫生出版社，2006：223-224.
[2]赵晓涛，张 正，贾 玫，等.心脑血管疾病患者的载脂蛋白E基因多态性与血脂水平相关性[J].中国民康医学杂志，2006，18(2)：88-94.
[3]Willer CJ， Sanna S，Jackson AU.et al. Newly identified loci that influence lipid concentrations and risk of coronary artery disease[J].Nat Genet，2008，40(2)：161-169.
[4]薛 慧，陈乃耀，赵 辉.载脂蛋白基因多态性与心脑血管疾病关系的研究[J].临床荟萃，2010，25(5)：451-453.
[5]孙洪英.载脂蛋白E基因多态性与血脂、脑血管疾病关系的研究进展[J].西部医学，2007，19(2)：292-294.
[6]黄保岗.载脂蛋白E基因多态性与脑血管疾病关系的研究进展[J].国际神经病学神经外科学杂志，2013，40(5-6)：460-462. (王雪梅 鲁庆波)
【关键词】载脂蛋白E；基因多态性；心脑血管疾病；血脂
【中图分类号】R285.5 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-6681.2015.05.0.02
心脑血管疾病是由基因与环境因素交互作用形成的慢性疾病[1]。具有发病率高、死亡率高、复发率高、致残率高且并发症较多的特点，目前已对人们的生命健康产生了严重威胁，因此受到人们的高度重视。近年来，有研究表明，心脑血管疾病与载脂蛋白E结构密切相关，载脂蛋白E(Apoliporotein E，Apo E)有ε2、ε3、ε4三种常见等位基因和ε2/2，ε2/3，ε3/3，ε2/4，ε3/4，ε4/4六种基因型，是血浆中较为重要的载脂蛋白，本文就心脑血管疾病与载脂蛋白E基因多态性及其血脂指标进行了相关性探究。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取我院2012年9月～2014年9月诊断为心脑血管疾病的住院患者203例为试验组，其中男108例，女95例，平均年龄(61.53±9.94)岁，正常人群195名为对照组，其中男98例，女97例，平均年龄(59.75±8.67)岁，两组患者的年龄、性别、文化程度等比较，差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 提取DNA
凌晨抽取患者静脉血2 mL，采用分离白细胞，低渗溶血，常规酚一氯仿法提取DNA，EDTA抗凝。
1.2.2 ApoE基因多态性检测
引物为：5’-ACAGAATTCGCCCCGGCCTGGTACAC-3’
5’-TAAGCTTGGCACGGCTGTCCAAGGA-3’[2]
PCR反应参数为：取PCR产物5 μL，加HhaⅠ酶3 U，37℃酶切5 h，用2%琼脂糖凝胶电泳分离酶切产物。结果可显示PCR产物为244bp，被酶切为91bp和83bp的片段为ε2基因，被酶切为91bp和48bp的片段为ε3基因，被酶切为72bp和48bp的片段为ε4基因。
1.2.3 血脂检测
所有血脂指标均用日立7170全自动生化仪分析测定。甘油三酯(TG)，血清总胆固醇(TC)采用终点法测定，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)则采用酶法测定。
1.3 数据处理
采用SPSS 18.0统计学软件进行分析，各组基因型及等位基因比较采用x2检验，计量资料采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 ApoE基因多态性与心脑血管疾病的相关性
试验组和对照组中ApoE基因型及等位基因的频率分布与心脑血管疾病的关联性分析结果见表1、表2。结果表明，试验组相对于对照组ApoEε2和ApoEε4比例较高，ApoEε3比例较低，差异有统计学意义(P<0.05)。心脑血管疾病与ApoE基因多态性之间存在关联。
2.2 各血脂指标与ApoE基因多态性的相关性
试验组各项血脂指标均高于对照组，在试验组中ε4的TC水平及ε2的TG水平明显较高。说明在心脑血管患者中ε2可能有升高TG的作用，而ε4可能有升高TC的作用，差异有统计学意义(P<0.05)。
3 讨 论
心脑血管疾病是心血管疾病和脑血管疾病的统称，其发病原因十分复杂，在我国，近年来发病率呈上升趋势，被怀疑与饮食、运动及吸烟等不良习惯有关，随着生活水平的提高，盐、糖、脂肪的高摄入使人们患心脑血管疾病的危险性增加，体力劳动减少，体重增加，使之成为心脑血管疾病的患病因素。有研究表明，Apo基因多态性能够影响血脂水平，与动脉粥样硬化的发生、发展密切相关[3]。
Apo基因多态性已发现20余种[4]，ApoE主要通过肝脏合成，位于19号染色体长臂13区2带[5]，是一种直接参与胆固醇代谢的蛋白[6]，现普遍认为，ApoE基因多态性可影响脂质代谢，并最终导致心脑血管疾病的发生，ApoE不同的基因型对血脂水平的影响也不同，所以本文应用聚合酶链式反应(PCR)技术和限制性片段长度多态性(RFLP)及血脂检测技术，对195例正常对照人群和203例心脑血管疾病患者进行了血脂水平的观察，并探究了心脑血管疾病与ApoE基因多态性及其血脂水平的关系。通过本次实验可得知，在中国黑龙江地区，载脂蛋白E2及E4等位基因在心脑血管疾病患者中的比例较高，具有相关性。在血脂水平上，ε2可能有升高患者TG的作用，而ε4可能有升高患者TC的作用。ApoEε2与甘油三酯水平及ApoEε4与总胆固醇水平具有相关性。可认为ApoEε2和ApoEε4可能是导致心脑血管疾病发病的危险因素。
参考文献
[1]马冠生，孔灵芝.中国居民营养与健康状况调查报告之九—2002行为和生活方式[M].北京：人民卫生出版社，2006：223-224.
[2]赵晓涛，张 正，贾 玫，等.心脑血管疾病患者的载脂蛋白E基因多态性与血脂水平相关性[J].中国民康医学杂志，2006，18(2)：88-94.
[3]Willer CJ， Sanna S，Jackson AU.et al. Newly identified loci that influence lipid concentrations and risk of coronary artery disease[J].Nat Genet，2008，40(2)：161-169.
[4]薛 慧，陈乃耀，赵 辉.载脂蛋白基因多态性与心脑血管疾病关系的研究[J].临床荟萃，2010，25(5)：451-453.
[5]孙洪英.载脂蛋白E基因多态性与血脂、脑血管疾病关系的研究进展[J].西部医学，2007，19(2)：292-294.
[6]黄保岗.载脂蛋白E基因多态性与脑血管疾病关系的研究进展[J].国际神经病学神经外科学杂志，2013，40(5-6)：460-462. (王雪梅 鲁庆波)