精子DNA损伤对体外受精—胚胎移植助孕结局的影响分析(2)
1.2 方法1.2.1 DFI检测方法(SCD法)
PBS调整精子浓度至500~1000万/mL,将30 μL低熔点琼脂糖管加入30 μL精液样本,于37℃水浴中备用;将琼脂糖精液20 μL加到预处理载玻片上,放入4℃冰箱中5 min;然后于变性液中反应7 min;取出后于裂解液中反应20 min;取出后置于蒸馏水中5 min后,于70%,90%、100%的乙醇溶液中保持2 min后取出晾干;蒸馏水冲洗玻片晾干;最后在光学显微镜下观察200个精子的涂片形态。DFI=(小光晕精子数+无光晕精子数+退化精子数)/200×100%。
1.2.2 IVF-ET术助孕方法
所有患者均采用达必佳短效长方案促排卵,均于排卵一周后每天皮下注射短效醋酸曲普瑞林注射液(Ferring GmbH公司)0.1mg,7天后改为每天0.05mg,直至HCG日降调节,降调节14天后根据卵泡数目及激素水平给予重组促卵泡素β注射液( N.V.Organon公司)和尿促性腺激素(HMG ......
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