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编号:13246390
SNP—array芯片技术与染色体核型分析对超声异常孕妇的妊娠指导的作用(2)
http://www.100md.com 2018年1月25日 《中西医结合心血管病电子杂志》 2018年第3期
     抽取的一管羊水,避免母血污染,用美国Affymetrix公司的750K SNP-array芯片,按试剂盒说明书操作。提取基因组DNA,测定核酸浓度(DNA浓度≧50 ml),取5 ul进行后续实验(核酸总量为250 ng);进行NspI酶切消化,获得具有黏性末端的基因组DNA片段;在酶切产物两端加上特异性识别该黏性末端的接头;使用特异性识别该接头的引物,进行PCR扩增,获得高丰度的基因组DNA(片段大小为150~2000 bp);磁珠纯化,洗涤去除酶`dNPT`引物等,获得纯化的PCR扩增产物;对纯化的PCR扩增产物,测定核酸浓度;使用片段化酶将基因组DNA进一步切碎成更小的片段(片段大小为25~125 bp);利用脱氧核苷酸末端转移酶对小片段末端进行标记;标记产物加入芯片中进行杂交16~18 h,次日在洗涤工作站上进行洗涤染色 ......
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