红霉素对支气管哮喘儿童Th1/Th2细胞及T淋巴细胞凋亡的调控研究(2)
![]() |
第1页 |
参见附件。
2.2 采用双抗体夹心ABC-ELISA法检测sFas/sFasL水平:用抗人Fas/Apo-1(或FasL)单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的Fas/Apo-1(或FasL)与单抗结合,加入生物素化的抗人Fas/Apo-1(或FasL)抗体,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入酶底物OPD,出现黄色,加终止液硫酸,颜色变深,在492nm处测OD值,Fas/Apo-1(或FasL)浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Fas/Apo-1(或FasL)浓度。
2.3 采用吖啶橙-溴化乙锭染色法分别检测培养0、48小时检测T淋巴细胞凋亡率:取淋巴细胞悬液25ul加2ul染液(吖啶橙100ug/ml,溴化乙锭100ug/ml,用PBS配制混匀)静止10分钟,取10ul于玻片上,荧光镜观察淋巴细胞,呈现核固缩,沿核膜点块状、新月状或杆状改变者为凋亡细胞,计数200个细胞并计算出凋亡细胞百分率。
3.统计学处理方法:采用SPSS12.0统计软件进行分析,计量资料以均数±标准差(x±S)表示,两均数比较采用t检验,P<0.05为差别有统计学意义,P<0.01为差别有显著统计学意义。
结果
1.治疗与对照组Th1、Th2及Th1/Th2检测结果,见表1。
2.治疗组与对照组T淋巴细胞凋亡率检测结果,见表2。 培养0小时及48小时两组比较,哮喘组均明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01),见表2。
3.治疗组与对照组血清sFas、sFasL检测结果,见表3。 治疗组均明显高于对照组,差异有显著统计学意义(P<0.01),见表3。
讨论
任何类型的哮喘病的基本病理变化都是一种气道炎症性改变,这种非特异的气道炎症是引起患儿气道高反应性、通气功能障碍及临床症状的关键因素 ......
您现在查看是摘要介绍页,详见PDF附件。