梅毒螺旋体抗体三种血清学检测方法的对比
【摘要】目的：分别用酶联免疫吸附试验(ELISA)、快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)三种方法检测梅毒抗体，比较三种方法在梅毒诊断方面的敏感性和特异性。方法：同时用ELISA、RPR和TPPA试剂对5450例住院及门诊病人血清进行检测，TPPA试验作为确证试验，从而得出其他两种方法的敏感性和特异性。结果： ELISA法的阳性率为96.47%，假阳性率为0.27% ;RPR法阳性率为 72.94%，假阳性率为0.45%。结论：ELISA法是一种高敏感性的梅毒血清学诊断检测方法，TPPA法应作为临床梅毒确诊的主要检测手段，RPR只能作为辅助试验及梅毒治疗的监测手段。如果三种方法联合使用，会降低假阳性率。
【关键词】梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)酶联免疫吸附试验(ELISA)快速血浆反应素试验(RPR)
【中图分类号】R840.5
【文献标识码】A
, 百拇医药
【文章编号】2095-6851(2019)11-042-01
近年来，梅毒的发病率逐年增高，已成为临床上最常见的性传播疾病之一。其传染性强，感染后可引起全身各组织、器官的损害，危害较大。人体感染后，体内能产生两种抗体：一是针对梅毒螺旋体产生的特异性抗体，即梅毒螺旋体抗体(IgG和IgM);另一类是非特异性脂质抗体，即反应素。在梅毒诊断中，由于抗体效价或方法特异性等原因使诊断结果常出现偏差，因此高效的梅毒实验室诊断已成为大势所趋，对控制梅毒蔓延意义重大。梅毒螺旋体感染的血清学诊断在我们实验室常用的有RPR，ELISA和TPPA，本研究选用这三种方法对患者血清样本中梅毒螺旋体抗体进行检测，并对三种方法的敏感性和特异性进行评价。现报道如下：
1 材料和方法
1.1 标本 血清标本来源于本院2019年收治门诊及住院患者5450例，静脉抽血4ml，分离血清备用。
, 百拇医药
1.2 试剂与仪器 ELISA试剂盒(珠海丽珠试剂有限公司提供);RPR试剂(上海荣盛公司提供)，TPPA试剂(日本富士株式会社提供)。
1.3 检测方法 每份标本分别用ELISA、RPR和TPPA三种方法进行检测，检测过程严格依照说明书操作。因TPPA法是梅毒血清学诊断的金标准，所以以TPPA阳性确认为梅毒抗体阳性。每组检测结果之间的比较采用X2检验，检验水准a=0.05。
2 结果
三种方法检测结果比较，ELISA法检出阳性者328例，阳性率为96.47%(328/340)，假阳性率为0.27% (14/5110);RPR法检出248例阳性，阳性率为72.94%(248/340)，假阳性率 为0.45%(23/5110);ELISA与RPR法均阳性的为240例，阳性率为70.59%(240/340)，假阳性率为0.098%(5/5110)。RPR法与TPPA比较，差异具有统计学意义(X2= 41.4， p<0.05)，ELISA法与TPPA比较，差异无统计学意义(X2= 0.038 ，p>0.05)。结果见表1、2。
, 百拇医药
3 讨论
梅毒是一种危害较严重的性传播疾病，人体感染苍白螺旋体后产生梅毒特异性抗体和非特异性抗体即反应素，RPR法测定反应素，ELISA和TPPA法测定抗体。从以上结果可以看出，RPR法检出率低，灵敏度低，容易漏检，这是因为这种方法对潜伏期梅毒、Ⅲ期梅毒和經大量抗生素治疗后的梅毒检出率低。同时RPR法还易出现较高的假阳性，因为RPR法是一类非特异性方法，某些疾病如水痘、自身免疫性疾病、妊娠患者、疟疾、老年等都可由于产生非特异性抗体而引起假阳性。TPPA是大家公认的检测梅毒的确认方法，无论是从灵敏度还是特异性来说都很准确，但是这种试剂昂贵，操作过程较繁琐，时间长、结果判断难以自动化，限制了其用于大规模标本的筛查。TPPA法是使用梅毒螺旋体毒株制成抗原，包被于明胶颗粒，检测血清中的梅毒特异性抗体。ELISA试验是随着近年梅毒螺旋体基因工程的研制成功而发展起来的一种血清学检测方法，是利用重组螺旋体抗原TP47、TmPA抗原包被微孔板和辣根过氧化物酶标记的TP47、TmPA抗原夹心法检测血清中的梅毒特异性抗体，该试验使用基因工程方法纸杯重组抗原代替以往使用的野生型梅毒螺旋体抗原，易于纯化，极大提高了试验的敏感性和特异性。ELISA试验操作简便，可实现自动化操作，能进行大批量样本检测，由仪器阅读实验结果，使结果更科学、客观、准确。ELISA与TPPA相关性良好，可以作为检测梅毒的筛选试验。
参考文献：
[1]程艳杰，王广杰，王旭. 梅毒螺旋体抗体检测方法的实验室评价。[J]中华检验医学杂志，2006，29(3)：272
[2]刘红杏，牛淑芳.梅毒螺旋体检测的实验研究进展[J].中国热带医学，2008，8(6)：1043-1044
[3]周洪伟，林松.三种方法检测梅毒螺旋体的比较[J]. 微生物学杂志，2005，25(3)：99-100, 百拇医药(李瑞丹)
【关键词】梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)酶联免疫吸附试验(ELISA)快速血浆反应素试验(RPR)
【中图分类号】R840.5
【文献标识码】A
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【文章编号】2095-6851(2019)11-042-01
近年来，梅毒的发病率逐年增高，已成为临床上最常见的性传播疾病之一。其传染性强，感染后可引起全身各组织、器官的损害，危害较大。人体感染后，体内能产生两种抗体：一是针对梅毒螺旋体产生的特异性抗体，即梅毒螺旋体抗体(IgG和IgM);另一类是非特异性脂质抗体，即反应素。在梅毒诊断中，由于抗体效价或方法特异性等原因使诊断结果常出现偏差，因此高效的梅毒实验室诊断已成为大势所趋，对控制梅毒蔓延意义重大。梅毒螺旋体感染的血清学诊断在我们实验室常用的有RPR，ELISA和TPPA，本研究选用这三种方法对患者血清样本中梅毒螺旋体抗体进行检测，并对三种方法的敏感性和特异性进行评价。现报道如下：
1 材料和方法
1.1 标本 血清标本来源于本院2019年收治门诊及住院患者5450例，静脉抽血4ml，分离血清备用。
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1.2 试剂与仪器 ELISA试剂盒(珠海丽珠试剂有限公司提供);RPR试剂(上海荣盛公司提供)，TPPA试剂(日本富士株式会社提供)。
1.3 检测方法 每份标本分别用ELISA、RPR和TPPA三种方法进行检测，检测过程严格依照说明书操作。因TPPA法是梅毒血清学诊断的金标准，所以以TPPA阳性确认为梅毒抗体阳性。每组检测结果之间的比较采用X2检验，检验水准a=0.05。
2 结果
三种方法检测结果比较，ELISA法检出阳性者328例，阳性率为96.47%(328/340)，假阳性率为0.27% (14/5110);RPR法检出248例阳性，阳性率为72.94%(248/340)，假阳性率 为0.45%(23/5110);ELISA与RPR法均阳性的为240例，阳性率为70.59%(240/340)，假阳性率为0.098%(5/5110)。RPR法与TPPA比较，差异具有统计学意义(X2= 41.4， p<0.05)，ELISA法与TPPA比较，差异无统计学意义(X2= 0.038 ，p>0.05)。结果见表1、2。
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3 讨论
梅毒是一种危害较严重的性传播疾病，人体感染苍白螺旋体后产生梅毒特异性抗体和非特异性抗体即反应素，RPR法测定反应素，ELISA和TPPA法测定抗体。从以上结果可以看出，RPR法检出率低，灵敏度低，容易漏检，这是因为这种方法对潜伏期梅毒、Ⅲ期梅毒和經大量抗生素治疗后的梅毒检出率低。同时RPR法还易出现较高的假阳性，因为RPR法是一类非特异性方法，某些疾病如水痘、自身免疫性疾病、妊娠患者、疟疾、老年等都可由于产生非特异性抗体而引起假阳性。TPPA是大家公认的检测梅毒的确认方法，无论是从灵敏度还是特异性来说都很准确，但是这种试剂昂贵，操作过程较繁琐，时间长、结果判断难以自动化，限制了其用于大规模标本的筛查。TPPA法是使用梅毒螺旋体毒株制成抗原，包被于明胶颗粒，检测血清中的梅毒特异性抗体。ELISA试验是随着近年梅毒螺旋体基因工程的研制成功而发展起来的一种血清学检测方法，是利用重组螺旋体抗原TP47、TmPA抗原包被微孔板和辣根过氧化物酶标记的TP47、TmPA抗原夹心法检测血清中的梅毒特异性抗体，该试验使用基因工程方法纸杯重组抗原代替以往使用的野生型梅毒螺旋体抗原，易于纯化，极大提高了试验的敏感性和特异性。ELISA试验操作简便，可实现自动化操作，能进行大批量样本检测，由仪器阅读实验结果，使结果更科学、客观、准确。ELISA与TPPA相关性良好，可以作为检测梅毒的筛选试验。
参考文献：
[1]程艳杰，王广杰，王旭. 梅毒螺旋体抗体检测方法的实验室评价。[J]中华检验医学杂志，2006，29(3)：272
[2]刘红杏，牛淑芳.梅毒螺旋体检测的实验研究进展[J].中国热带医学，2008，8(6)：1043-1044
[3]周洪伟，林松.三种方法检测梅毒螺旋体的比较[J]. 微生物学杂志，2005，25(3)：99-100, 百拇医药(李瑞丹)