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编号:13575602
发酵虫草菌粉多糖免疫活性实验研究(2)
http://www.100md.com 2018年8月1日 《世界睡眠医学杂志》 20188
     1.2 方法

    1.2. 分组与模型制备

    1.2.1. 分组 分正常组、对照组(ConA组或LPS组)、给药组(低剂量组、中剂量组、高剂量组)。

    1.2.1.2 小鼠原代脾细胞悬液的制备 放血处死Bald/C小鼠,在超净台无菌条件下将取出的脾脏放在置于盛有10 mL RPMI 1640培养基的灭菌玻璃培养皿中的100目尼龙网筛上,然后用消毒的玻璃注射器针芯研磨脾脏,使其细胞滤过网筛,制成脾细胞悬液。以 000 r/min离心脾细胞悬液10 min,弃上清,加入2 mL Tris-NH4Cl缓冲液作用3~5 min,再加3 mL培养基同上离心洗涤2次,再次重悬细胞,用含20%FBS的RPMI 1640培养基调整细胞密度为5×109/L。

    1.2.1.3 小鼠腹腔巨噬细胞悬液的制备 处死小鼠,在超净台无菌条件下腹腔注射含5%FBS的RPMI 1640培养液,然后抽取腹腔溶液,离心10 min(600×g),弃上清,加入红细胞溶胀液后 ......
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