六味地黄丸和塞络通对肾虚型老年痴呆动物模型的改善状况观察
摘要:目的比较六味地黄丸和塞络通对肾虚型老年痴呆动物模型的改善作用方法将60只小鼠随机分为空白对照组、模型组、六味地黄丸组和塞络通胶囊组,每组15只。结论六味地黄丸可明显改善肾虚型老年痴呆小鼠的痴呆症状,效果优于塞络通胶囊。
关键词:肾虚; 老年痴呆; 氢化可的松; 六味地黄丸; 塞络通;
Abstract: Objective To compare the Six Ingredient Rehmannia Pill and SLT improvement of kidney deficiency type senile dementia animal model of 60 mice were randomly divided into blank control group, model group, Six Ingredient Rehmannia Pill group and plug Luotong capsule group, with 15 rats in each group. Conclusion the Six Ingredient Rehmannia Pill can obviously improve the kidney deficiency type senile dementia mice dementia symptoms, is better than the plug contact capsule.
, 百拇医药
老年性痴呆是指由于神经退行性病变、脑血管病变、肿瘤、营养代谢障碍等多种原因引起的以认知功能缺损为主要临床表现的一组老年疾病。近年来,发病率逐年上升,随着我国人口老龄化的问题日益加剧,给国家、社会和家庭带来沉重的负担。本研究主要探讨传统补肾药六味地黄丸和非对症药塞络通对该模型的改善作用。
1 材料与方法
1.1动物分组及处理
8周龄SPF级昆明小鼠60只,体重33.0~35.0g,全部雄性,饲养温度22℃~25℃,明暗周期12h/12h。动物适应1周后,随机分为4组: 对照组、模型组、六味地黄丸组和塞络通组,每组20只。 第1~40天,除对照组每日皮下注射生理盐水外,其余各组均按照15 mg/kg体重皮下注射氢化可的松。
1.2主要试剂及设备
, 百拇医药 1.2.1 主要试剂β-淀粉样蛋白( 25-35)、氢化可的松注射液、小鼠IL-2、 IL-6、ELISA试剂盒)、胆碱乙酰转移酶试剂盒、乙酰胆碱酯酶试剂盒及考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、六味地黄丸、塞络通胶囊。
1.2.2 主要设备Morris水迷宫行为实验系统、 TECAN多功能自动酶标仪。
1.3 Morris水迷宫行为测试
1.3.1 适应水迷宫并初检游泳能力 为了让小鼠适应环境并初步检验其游泳能力,以便对明显异常者予以剔除,我们在第1天让小鼠从池壁一固定点面向池壁入水自由游泳2分钟并记录游泳轨迹。
1.3.2 定位航行训练 第31天将小鼠放至平台(第四象限中点),使其停留约20秒后,面向池壁由第一象限的中点放入水中迷宫。系统自动记录信息:小鼠在120 内寻找平台的时间逃避潜伏期和入水后的初始角度游泳速度行程等。如果120s内未找到平台,则由将其引上平台使其在平台上停留20妙后再放入水中,并认定其逃避潜伏期为120秒。第32天开始而是直接进行训练,不放至平台,每天按逆时针方向更换入水点。该训练每天上午下午各3次,共历时5天。
, 百拇医药
1.3.3 空间探索测试第7天撤除平台后将小鼠放入平台对侧象限中点的水中自由游泳120s,记录小鼠在第四象限停留的时间,用于测量小鼠空间位置的记忆能力。
2 结果
2.1 各组小鼠记忆能力对比
四组小鼠的定位导航能力不尽相同(P<0.05),空白组的逃避潜伏期明显短于其他各组,模型组最长,六味地黄丸组短于塞络通胶囊组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。空白组的平均速度快于其他组,模型组最慢,差异有统计学意义(P<0.05),塞络通胶囊组与六味地黄丸组相近,差异无统计学意义(P>0.05)。四组小鼠的空间探索能力也不全相同,空白对照组时间最长,六味地黄丸组和塞络通胶囊组均长于模型组,六味地黄丸组空间探索耗时长于塞络通胶囊组,差异均具有统计学意义(P<0.05).
2.2 各组小鼠海马组织IL-2、IL-6水平对比
, 百拇医药
塞络通胶囊组和六味地黄丸组海马组织的IL-2、IL-6均高与空白对照组,三组均低于模型组,塞络通胶囊组高于六味地黄丸组,差异均具有统计学意义(P<0.05),详见表1。
表2各组小鼠海马组织IL-2、IL-6水平对比()
组 别nIL-6(μg/kg)IL-2(μg/kg)
空白对照组152.12±0.35*2.15±0.19
模型组154.53±1.083.25±1.00△
塞络通胶囊组153.28±1.12*2.68±0.82△
六味地黄丸组152.92±0.58*2.32±0.77△
与模型组比较*P<0.05,△与空白对照组比较P<0.05
, http://www.100md.com
3 讨论
ACh作为胆碱能神经元传递信号的神经递质,与认知学习及记忆有关。ChAT在胆碱能神经元细胞体内促进ACh合成,与ACh的分布几乎平行,是胆碱能神经元的特殊标志。徐立等研究显示塞络通可以通过抑制慢性脑低灌注大鼠的AchE活性来增加ACh含量水平。在本研究中观察塞络通和六味地黄丸对肾虚老年痴呆动物模型脑组织中ChAT和AchE活性,发现二者均能够明显促进提高ChAT活性,同时抑制AchE活性,提示二者均有影响ChAT和AchE活性的作用。六味地黄丸促进ChAT活性效果优于塞络通,但是在抑制AchE活性方二者并没有差异,提示二者在促进ChAT活性的机制方面存在差异,有待深入探讨。
4参考文献:
1沈自尹,黄建华,林伟,等. 从整体论到系统生物学进行肾虚和衰老的研究[J].中国中西医结合杂志,2009,29(6):548-550.
2周慧生.六味地黄丸延缓衰老作用的理论探讨[J].光明中医,2006,2(10):45., 百拇医药(刘洪 刘青)
关键词:肾虚; 老年痴呆; 氢化可的松; 六味地黄丸; 塞络通;
Abstract: Objective To compare the Six Ingredient Rehmannia Pill and SLT improvement of kidney deficiency type senile dementia animal model of 60 mice were randomly divided into blank control group, model group, Six Ingredient Rehmannia Pill group and plug Luotong capsule group, with 15 rats in each group. Conclusion the Six Ingredient Rehmannia Pill can obviously improve the kidney deficiency type senile dementia mice dementia symptoms, is better than the plug contact capsule.
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老年性痴呆是指由于神经退行性病变、脑血管病变、肿瘤、营养代谢障碍等多种原因引起的以认知功能缺损为主要临床表现的一组老年疾病。近年来,发病率逐年上升,随着我国人口老龄化的问题日益加剧,给国家、社会和家庭带来沉重的负担。本研究主要探讨传统补肾药六味地黄丸和非对症药塞络通对该模型的改善作用。
1 材料与方法
1.1动物分组及处理
8周龄SPF级昆明小鼠60只,体重33.0~35.0g,全部雄性,饲养温度22℃~25℃,明暗周期12h/12h。动物适应1周后,随机分为4组: 对照组、模型组、六味地黄丸组和塞络通组,每组20只。 第1~40天,除对照组每日皮下注射生理盐水外,其余各组均按照15 mg/kg体重皮下注射氢化可的松。
1.2主要试剂及设备
, 百拇医药 1.2.1 主要试剂β-淀粉样蛋白( 25-35)、氢化可的松注射液、小鼠IL-2、 IL-6、ELISA试剂盒)、胆碱乙酰转移酶试剂盒、乙酰胆碱酯酶试剂盒及考马斯亮蓝蛋白测定试剂盒、六味地黄丸、塞络通胶囊。
1.2.2 主要设备Morris水迷宫行为实验系统、 TECAN多功能自动酶标仪。
1.3 Morris水迷宫行为测试
1.3.1 适应水迷宫并初检游泳能力 为了让小鼠适应环境并初步检验其游泳能力,以便对明显异常者予以剔除,我们在第1天让小鼠从池壁一固定点面向池壁入水自由游泳2分钟并记录游泳轨迹。
1.3.2 定位航行训练 第31天将小鼠放至平台(第四象限中点),使其停留约20秒后,面向池壁由第一象限的中点放入水中迷宫。系统自动记录信息:小鼠在120 内寻找平台的时间逃避潜伏期和入水后的初始角度游泳速度行程等。如果120s内未找到平台,则由将其引上平台使其在平台上停留20妙后再放入水中,并认定其逃避潜伏期为120秒。第32天开始而是直接进行训练,不放至平台,每天按逆时针方向更换入水点。该训练每天上午下午各3次,共历时5天。
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1.3.3 空间探索测试第7天撤除平台后将小鼠放入平台对侧象限中点的水中自由游泳120s,记录小鼠在第四象限停留的时间,用于测量小鼠空间位置的记忆能力。
2 结果
2.1 各组小鼠记忆能力对比
四组小鼠的定位导航能力不尽相同(P<0.05),空白组的逃避潜伏期明显短于其他各组,模型组最长,六味地黄丸组短于塞络通胶囊组,差异均具有统计学意义(P<0.05)。空白组的平均速度快于其他组,模型组最慢,差异有统计学意义(P<0.05),塞络通胶囊组与六味地黄丸组相近,差异无统计学意义(P>0.05)。四组小鼠的空间探索能力也不全相同,空白对照组时间最长,六味地黄丸组和塞络通胶囊组均长于模型组,六味地黄丸组空间探索耗时长于塞络通胶囊组,差异均具有统计学意义(P<0.05).
2.2 各组小鼠海马组织IL-2、IL-6水平对比
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塞络通胶囊组和六味地黄丸组海马组织的IL-2、IL-6均高与空白对照组,三组均低于模型组,塞络通胶囊组高于六味地黄丸组,差异均具有统计学意义(P<0.05),详见表1。
表2各组小鼠海马组织IL-2、IL-6水平对比()
组 别nIL-6(μg/kg)IL-2(μg/kg)
空白对照组152.12±0.35*2.15±0.19
模型组154.53±1.083.25±1.00△
塞络通胶囊组153.28±1.12*2.68±0.82△
六味地黄丸组152.92±0.58*2.32±0.77△
与模型组比较*P<0.05,△与空白对照组比较P<0.05
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3 讨论
ACh作为胆碱能神经元传递信号的神经递质,与认知学习及记忆有关。ChAT在胆碱能神经元细胞体内促进ACh合成,与ACh的分布几乎平行,是胆碱能神经元的特殊标志。徐立等研究显示塞络通可以通过抑制慢性脑低灌注大鼠的AchE活性来增加ACh含量水平。在本研究中观察塞络通和六味地黄丸对肾虚老年痴呆动物模型脑组织中ChAT和AchE活性,发现二者均能够明显促进提高ChAT活性,同时抑制AchE活性,提示二者均有影响ChAT和AchE活性的作用。六味地黄丸促进ChAT活性效果优于塞络通,但是在抑制AchE活性方二者并没有差异,提示二者在促进ChAT活性的机制方面存在差异,有待深入探讨。
4参考文献:
1沈自尹,黄建华,林伟,等. 从整体论到系统生物学进行肾虚和衰老的研究[J].中国中西医结合杂志,2009,29(6):548-550.
2周慧生.六味地黄丸延缓衰老作用的理论探讨[J].光明中医,2006,2(10):45., 百拇医药(刘洪 刘青)
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