张 媛，常思源

    (1.南京钟鼎生物技术有限公司研发部，江苏 南京 210034 ；2.南京科技职业学院生命健康学院，江苏 南京 210048)

    噬菌体是能够侵袭细菌、真菌、藻类、放线菌或螺旋体等微生物的一类病毒的总称。噬菌体的基因组中含有许多个基因。所有已知的噬菌体均是由细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身的生长和增殖。噬菌体具有严格的宿主特异性，只寄居在易感宿主的菌体内。噬菌体抗体库技术是一项新的基因工程抗体制备技术。该技术在人源性抗体克隆、抗体技能改造、抗体基因研究等方面发挥着重要的作用。在对噬菌体抗体库进行筛选的过程中，按照噬菌体抗体库的具体分类选择合适的筛选方法尤为重要。通过聚合酶链式反应(PCR)等基因工程的方法，能够对噬菌体进行扩增，以获得抗体的可变区和/ 或恒定区，然后利用酶连或重组技术将目的基因构建至特定的噬菌粒载体中，使外源基因与噬菌体的核衣壳蛋白Ⅲ或Ⅷ融合表达,进而可直接展示在噬菌体核衣壳表面获得的噬菌体抗体库。有研究表明，外源多肽或蛋白的基因主要与噬菌体的DNA 融合表达，基因与表型之间是一一对应的关系。因此，直接通过对筛选获得的噬菌体DNA 进行一代测序即可获得抗体基因序列的具体信息，进而为新药及疫苗的研制奠定基础[1]。本研究主要是探讨噬菌体抗体库的分类与筛选方法。

    1 噬菌体抗体库的分类

    按照抗体库的来源可将噬菌体抗体库分为免疫噬菌体抗体库和非免疫噬菌体抗体库两大类。免疫噬菌体抗体库来源于经过免疫接种动物的组织或血清。非免疫噬菌体抗体库来源于未经过免疫接种动物的组织或血清。非免疫噬菌体抗体库除了可直接通过动物的组织或血清获得，还可通过半合成或全合成的方式获得[2]。

    1.1 免疫噬菌体抗体库

    免疫噬菌体抗体库是指从获取细胞免疫或体液免疫(包括但不局限于注射疫苗、感染微生物、罹患肿瘤性疾病等)后的个体上获得的抗体库 ......