郑志聪，麦彩园，王 斌

    (1. 佛山市三水区妇幼保健院外科，广东 佛山 528100 ；2.广东省妇幼保健院妇产科，广东 广州 510010 ；3. 佛山市三水区人民医院外科，广东 佛山 528100)

    乳腺癌是女性群体中发病率最高的恶性肿瘤。每年有数以万计的女性死于乳腺癌，且近年来此病的发病率逐年升高[1]，此病患者的发病年龄呈年轻化的趋势[2]。有效治疗乳腺癌是一个亟待解决的问题[3]。近年来在乳腺癌的治疗方面不断涌现出先进的治疗方法，引入分子基因特征平台管理乳腺癌有助于更有效地治疗此病，降低此病患者的死亡率[4]。MicroRNA(miRNA)是一种非编码RNA 分子，能与互补碱基配对，识别并直接调控靶基因，影响其翻译，进一步实现转录后调控[5]。miRNA 能显著促进细胞的正常生长，维持细胞的功能，miRNA 表达的变化与癌症有着密切的关系[6]。目前已证实，miRNA 可抑制肿瘤[7]。降低miR-16-5p 可促进乳腺癌的生长[8]。NOD 样受体蛋白1(nod like receptor proein 1，NLRP1)是最早被发现的炎性体，可通过对先天性和适应性免疫、细胞凋亡、分化的调节而在肿瘤的发生中发挥致病作用[9]。MiRNA-16-5p 可通过靶向NLRP1 来抑制白细胞介素-1β(IL-1β)、细胞介素-18(IL-18)的表达，从而改善缺氧复氧引起的BRL-3A 细胞焦亡[10]。基于以上背景，本文欲探讨miR-16-5p 靶向调控NLRP1对抑制乳腺癌增殖的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 仪器及试剂

    紫外分光光度计、PCR 检测系统、双荧光素酶报告检测系统、电泳仪、转膜仪，以上仪器均由美国Progmega 公司生产。RNA 提取试剂盒、反转录试剂盒、Trizol 液、引物、CCK-8 溶液，以上试剂均由中国爱必信生物科技有限公司生产。BCA 蛋白定量试剂盒、载体、培养液，以上试剂均由中国Takara 公司生产。Western-Blotting 的一、二抗体，由美国abcam 公司生产。质粒抽提试剂盒、miR 模拟物及对照物、NLRP1 过表达载体、Trizol 试剂，以上试剂均由中国铎洋生物有限公司生产。

    1.2 研究对象

    1.2.1 病例信息 本研究收集广东省妇幼保健院、佛山市三水区人民医院2018 年12 月至2021 年12 月期间经手术切除的乳腺标本60 份 ......