刘 梅，郝长伟

    (1.东营市第二人民医院药学部，山东 东营 257335；2.包头东宝生物技术股份有限公司，内蒙古 包头 014030)

    花青素(Anthocyanin)又称花色素、花色苷，属于生物类黄酮物质，是一种广泛存在于植物中的天然色素。花青素具有很强的生物活性，可发挥抗氧化、清除自由基、缓解视力疲劳、预防阿尔茨海默病等作用，已成为近年来的研究热点[1-2]。相对于化学制剂，天然成分安全性更高，备受人们青睐。如何简化天然成分提纯工艺、降低成本、提高收率已成为研究者关注的热点问题。基于此，本试验对越橘花青素提取工艺和纯化工艺进行研究，确定最佳工艺参数，为越橘花青素的后续开发利用提供研究数据。

    1 材料与方法

    1.1 材料和试剂

    越橘果：经鉴定为杜鹃花科越橘属(Vaccinium Spp)浆果类植物果实，低温贮藏备用。试剂：浓盐酸；甲醇(分析纯)，无水乙醇，飞燕草素对照品(纯度≥97%)，氢氧化钠(分析纯)，盐酸(分析纯)，95% 乙醇(分析纯)，水(超纯水)，大孔树脂(D101，AB-8，DA201-C)。

    1.2 仪器和设备

    AB204-S 型电子分析天平(德国Sartorius)，HH-S8 型数显恒温水浴锅(常州国宇仪器制造有限公司)，Alpha-1900S 双光束扫描型紫外可见分光光度计(上海谱元仪器有限公司)，GT10-1 型高速台式离心机(河北医众医疗器械有限公司)，冷冻干燥机(上海继谱电子科技有限公司)，SHB-IIIS 型台式循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)，N-1300V-WB 旋转蒸发仪(东京理化器械株式会社)，CHA-SA 空气浴振荡器(常州市国旺仪器制造有限公司)。

    1.3 方法

    1.3.1 原料前处理 挑选成熟度均一的越橘果，清洗、沥干表皮水分、打浆，置于冷冻干燥机中预冻4 h，冻干36 h，粉碎，过80 目筛，制成越橘冻干粉，于-10 ℃密封避光保存备用[3]。

    1.3.2 供试品溶液制备[3]取越橘冻干粉5 g，精密称定，置于100 mL 棕色容量瓶中，加入一定体积和确定pH 值的乙醇溶液，置于预先设定好的水浴温度下浸提一段时间。提取结束后，将提取液倒入离心管中，置于冷冻离心机中离心10 min，转速为4000 r/min。取1 mL 上清液置于100 mL 棕色容量瓶中，用2%盐酸-甲醇稀释至适量，置于80 ℃水浴锅中水浴30 min，冷却。加2% 盐酸- 甲醇稀释至刻度线 ......