束宁德，刘庆新，曹晓雨

    (滨州医学院附属医院神经内科，山东 滨州 256600)

    椎基底动脉延长扩张症(Vertebrobasilar Dolichoectasia，VBD)是进行性发展的脑血管疾病，且与卒中的发生联系紧密[1]。随着VBD 血管病变程度的加重，脑缺血区域会增加[2]。根据多项动物实验及尸检报告可以明确VBD血管的病理特征为血管迂曲扩张，血管壁变薄，血管的弹性纤维断裂伴随内弹力层变性、间隙增多，血管平滑肌层全层萎缩[3]。

    自噬能改善动脉瘤的血管重构[4-6]，抑制自噬的激活可能对主动脉夹层存在治疗作用[7]。Wu、Liu 等人的研究也发现在血管炎症以及动脉瘤等疾病中，亚精胺、STAT3抑制剂可通过激活自噬保护细胞，减轻血管炎症，改善动脉瘤的血管重构[5-6]。Azza 团队通过系统性回顾研究验证发现，自噬不仅存在保护作用，过度激活的自噬也可加快细胞凋亡，导致细胞的死亡[8]。VBD 属于血管形态学改变疾病，血管中存在多种结构破坏表现，是否有自噬的参与尚未见研究报道。

    二甲双胍是一类降糖药物，同时还具有抗炎、内皮细胞保护、抗衰老等多种功能。以往的研究证实二甲双胍能够增加自噬相关蛋白 LC3II/I、beclin 1，且能改善血管收缩功能[9]。硫酸羟氯喹是一种著名的抗疟药，也是临床上常用的自噬抑制剂。本实验拟构建 VBD 大鼠模型，通过应用二甲双胍及硫酸羟氯喹处理 VBD 大鼠，检测各组大鼠血管平滑肌细胞自噬标志蛋白(LC3B、p62)，探讨二甲双胍诱导的自噬在VBD 病程中的作用及机制，为VBD 的预防及治疗提供思路。

    1 材料与方法

    1·1 实验动物与试剂

    选 择6 ～7 周 体 重200 ～220 g SPF 级SD 大 鼠 共64 只(济南朋悦繁育有限公司)，饲养于滨州医学院附属医院实验动物中心。环境温度18 ～25℃，环境湿度40%～70%，换气次数10 ～20 次/h，光暗交替比例1∶1，定时饲喂等量紫外线消毒鼠粮、更换高压蒸汽灭菌水。本动物实验已通过滨州医学院附属医院伦理委员会审核。

    弹性蛋白酶(Worthington Biochemical 公司)、盐酸二甲双胍(中美上海施贵宝制药有限公司)、硫酸羟氯喹 (上海上药中西制药有限公司)、LC3B 抗体(Proteintech Group)、p62 抗体 (博士德生物)、β-actin抗体 (博士德生物)、抗兔IgG 抗体(博士德生物)。 ......