改良方法与传统方法对富血小板血浆血小板回收率的对比研究
离心法,全血,计数,1材料与方法,1·1实验对象选择标准,1·2主要试剂与仪器,1·3PRP制备方法,1·4数据收集及计算血小板回收率,1·5统计学方法,2结果,3讨论
邓述欢,黄少媛,张栋武(1·佛山市顺德区乐从医院,广东 佛山 528315;2·佛山市高明区人民医院,广东 佛山 528500)
富血小板血浆(Platelet-Rich Plasma,PRP)是一种通过离心自体外周血获得的血小板浓缩物[1]。研究已证实 PRP 激活后,血小板中的 α 颗粒可释放PDGF、VEGF、TGF-β、IGF 和 EGF 等多种生长因子[2-3]。PRP具有促进组织修复的作用,且来源于自体,具有无排斥反应和来源便捷等优势,临床上已广泛用于骨不连、慢性肌腱损伤、慢性创面、关节内软骨损伤和骨关节炎等多种疾病的治疗[4-7]。目前,临床上使用的 PRP 制备套装主要采用二次离心法和一次离心法。血小板回收率是用于比较制备方法优劣的指标,有学者[8]用血小板回收率对4 种不同参数的PRP 制备方法进行了比较,分析方法的优劣,并提出了改良方法。传统的血小板回收率计算公式为:血小板回收率=(PRP 体积×PRP 中血小板浓度)/(全血体积×全血中血小板浓度)×100%;用此方法计算的血小板回收率均较低,在 46·9%左右[9-12]。此方法计算血小板回收率受较多因素的影响,特别是受人为因素的影响较大,进而影响PRP在临床中的治疗效果,使得PRP 在临床治疗中的推广受限[13-15]。在制备PRP 时因血小板在中高速离心后多聚集在管底部,且有聚集成团的现象,操作者通常用吸管吹打数次后取100 μL 移于PVC 管用于计数,吹打次数不够,血小板未充分悬浮,可导致计数偏低。其次因为PRP 的血小板浓度是基数血小板的数倍,而仪器计数有线性范围,有学者通过对某款仪器进行性能分析发现,其线性范围为( 0 ~977)×109/L, 而PRP的血小板浓度常有超过这一范围的情况,所以易导致误差。本研究通过对贫血小板血浆(Platelet-Poor Plasma,PPP)的血小板计数,用差值计数法得到PRP的真实浓度,再用血小板回收率的计算公式计算回收率。该方法不受上述因素影响,准确度可提高。研究表明,PPP 计数法的回收率明显高于PRP 计数法的回收率,且其方法简单不需要额外的仪器,只要有血球分析仪的实验室都可开展,是值得推广的方法。
1 材料与方法
1·1 实验对象选择标准
取 68 例成年健康志愿者的外周血(6 支 9mL/例) ......
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