樊恒达，郭学涛

    (上海汉智工程设计与顾问有限公司山东分公司，济南 250101)

    癌症是危害人类健康的主要疾病之一，而抗体药物则是预防和治疗癌症的主要目标之一[1]。目前，已进行临床使用的肿瘤药物很容易出现敌我不分的现象，无法区分患者体内的健康细胞，有时甚至会同时杀死肿瘤细胞和癌症细胞[2]。“生物导弹”概念的出现，成为解决该难题的一个理想思路[1]。这种药物经过静脉注射到人体内，药效分子通过靶向作用，精确集中作用于肿瘤细胞，既可以增强疗效，也可以减少对机体产生毒副作用[3]。单克隆抗体由于具有良好的均一性和高度的特异性，因而在癌症治疗领域中得到了广泛应用。

    1972年杂交瘤技术理念被科勒和米尔斯坦证明后，单克隆抗体的开发和应用，立即成为医学和科学研究的热点。传统的蛋白质免疫技术的程序是将体外合成和纯化抗原转入动物体内，产生免疫应答反应，而DNA免疫技术将带有目的基因序列的质粒DNA转入动物体内，外源基因序列在宿主细胞内得以表达并诱导机体免疫应答[4]。

    DNA免疫可以诱导宿主产生免疫反应，尤其是抗原特异性抗体反应的分子机制，即单克隆抗体的诱导开发，包括DNA疫苗构建，递送方式，分子佐剂和DNA初免-蛋白质加强免疫等技术。

    我国的抗体药物产业尚处于起步阶段，近10年，国内先后涌现出中信国健，百泰生物等多家专门从事单抗药物的生产企业，同时还有许多传统制药企业也加入到抗体药物研发领域，但是总体而言，在我国抗体行业，普遍存在的问题是细胞系表达水平低，培养规模小，纯化等技术问题，限制了我国抗体药物产业的产能规模，制约了行业的发展进程[5]。

    1 单克隆抗体原液制备流程

    1.1 单克隆抗体原液制备流程框图

    单克隆抗体原液的生产工序包括：种细胞的复苏、细胞接种培养，细胞扩增培养，收获细胞培养液，粗纯液制备，精纯液制备，原液灌装，同时涉及培养基配置、缓冲液配置、质检等，如图1所示。

    图1 单克隆抗体原液制备流程框图Fig.1 Flow chart of preparation of monoclonal antibody stock solution

    2 单克隆抗体原液制备流程工艺解析

    2.1 细胞培养基及缓冲液配置 ......