王可

    (吉林医药设计院有限公司，吉林 吉林 130000)

    单抗即单克隆抗体，是通过将抗原注入到宿主动物体内启动机体免疫应答而产生的。单抗药物在病毒性疾病、自身免疫性疾病、恶性肿瘤及烈性传染病的防治领域有着突出的作用，在COVID-19 防治中也有着不俗的表现。我国单抗都是采用哺乳动物细胞进行表达，主要以中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)为主。在抗体纯化过程中除了要考虑回收率和纯度以外，还需有效的灭活和清除病毒。单抗原液车间生产的原液不适用热力灭菌工艺，通常选择无菌操作的非最终灭菌生产工艺[1]，这对车间环境以及微生物污染水平的控制要求较高。本文将从单抗原液车间生产工艺及平面布局设计方面共同探讨单抗原液车间的设计方法。

    1 关于单抗病毒的风险

    CHO 细胞系是制造许多治疗性蛋白质的主力。CHO 细胞的生物安全等级为一级，CHO 本身存在内源性逆转录病毒，这是已经被证实了的，但这种病毒对人类不具有致病性。从药物质量安全角度出发，遵循SFDA 公布的《人用单克隆抗体质量控制技术指导原则》，加入病毒去除和灭活方法。

    此外，基于哺乳动物细胞进行的培养发酵，产品被病毒污染是考虑的主要生产风险之一。病毒污染的其他潜在来源可能还有：使用已经被污染了的主细胞种子库或工作细胞种子库；操作员可能带进病毒，污染工艺；细胞线残留上一级仍有活力的病毒。因为哺乳动物细胞为带入的病毒污染物提供了合适的宿主细胞，因此病毒量可能会随着细胞培养而放大，进而可能增加生产过程的整体风险。

    2 单抗原液车间的设计理念

    为了最小化病毒污染的风险或降低将污染物携带至最终产品的风险，尽量减轻生产环境的微生物负载，所有带有病毒风险的工艺步骤应该在各自独立生产间中完成，采取单向流设计。单向流是通过将车间分为供应侧走廊(共用的供应走廊，进入工艺间的人物流通道)和废弃物走廊(用于收集各个生产工艺间潜在被污染的物料的共用走廊)实现的。在废弃物走廊收集的物料和废弃物需经过充分处理后，才能转运至供应侧，要避免携带污染物。物料经过双扉式灭菌柜去污后，才能从返回走廊进入洁净区。

    3 生产工艺核心内容的设计要点

    单抗原液的生产工艺主要概括为两个阶段：上游细胞的培养、发酵和下游的纯化。细胞种子经摇瓶、WAVE 反应器、一、二、三级种子培养扩增后进入发酵罐进行发酵培养。发酵结束后经离心机进入下游进行纯化。离心后的料液经过层析、超滤后变成原液。原液生产过程中还有辅助系统：培养基配制、缓冲液配制以及CIP 等系统 ......