王园，鞠立逵

    (兰州理工大学，甘肃 兰州 730050)

    目前，我国生物制药行业最大的瓶颈就是如何从多样化的发酵液中提取出高纯度的微生物活性物质，由于发酵液中具有超多成分不明且极其复杂的微生物生理活性物质，并且具有很多次级代谢物质，所以在进行微生物制药时，发酵液的分离纯化过程是最重要的环节，也可以称作发酵液的后处理，而我国经过长时间的科研证明分离纯化的过程所需要的费用成本极高，所以实现微生物分离纯化的经济性与有效性成为当下研究热点。近年来，我国有众多学者探讨了微生物的分离纯化技术，文献[1]通过PDA 培养基划线技术，实现了霉变微生物的精准及快速分离纯化；文献[2]通过硫酸铵分级分离技术，实现了耐热性较好的尖孢镰刀菌M1 的有效分离纯化；文献[3]通过多种技术组合的方法，实现了噬菌体的有效分离纯化；文献[4]通过膜分离技术，实现了甘草酸提取液的低成本分离纯化；文献[5]研究了尿素包合技术、分子蒸馏技术等时下常见的α-亚麻酸分离纯化技术，并总结了相关原理和优缺点，为后续科研提供参考。但是上述几种方法进行分离纯化的效果不佳。本文借阅相关参考资料，通过大孔吸附树脂对微生物制药分离纯化技术进行了深入分析。

    1 实验准备与方法

    1.1 实验材料及仪器设备

    大孔吸附树脂[6]是近年来发展十分迅速的有机吸附剂，它的结构特别，为大孔网状，并且此树脂中没有交换基因，所以深受食品、医药等领域的喜爱。所以本文利用大孔吸附树脂于兰州理工大学的生物实验室进行了8 种微生物药品的分离纯化实验，本次实验选取的这8 种微生物药品包括：头孢氨苄、金担子素A 和莫能菌素为代表的β-内酰胺类抗生素、多肽类抗生素和聚醚类抗生素，本次实验中分别按顺序标记为A、B、C；由罗红霉素、柔红霉素和卡那霉素为代表的大环内酯类抗生素、蒽环类抗生素和氨基糖苷类抗生素，本次实验中分别按顺序标记为D、E、F；还有由SMTP-3 以及青霉素为代表的含氮杂环类抗生素和多烯类抗生素，本次试验中分别按顺序标记为G、H。

    本次实验所用到的仪器包括：电子天平AG245；恒温振荡器KO2525S；高效液相色谱仪AGILENT1260；高效液相色谱(HPLC)；真空烘箱DN50；超声波清洗器KQ-250DE；层析柱25×200 mm；50 mL 和100 mL 的具塞锥形瓶；50 mL 和100 mL 的烧杯；10 mL 的高型称量瓶；15 mL 的扁形称量瓶 ......